KIF17在孕中期母体接受丙泊酚麻醉对子代大鼠学习记忆损害中的作用

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目的:观察孕中期母体接受丙泊酚麻醉对子代大鼠海马组织 KIF17蛋白、NR2B总蛋白及NR2B膜蛋白表达水平的影响,从而探讨其对子代学习记忆的影响机制。  方法:清洁级雌性SD大鼠30只,将其随机分为丙泊酚4小时组(P4组)、丙泊酚8小时组(P8组)及对照组(C组),每组10只。于孕14天,P组孕鼠经尾静注射20mg/kg丙泊酚行麻醉诱导,然后以20mg/kg.h的速度分别持续输注4h和8h,对照组以相同的方式同样的速度输注等量生理盐水。于子鼠出生第30天,运用Morris水迷宫系统测定子鼠空间学习记忆功能,然后,取双侧大脑海马组织,通过western blot蛋白质印迹法测定海马组织KIF17蛋白、NR2B总蛋白及NR2B膜蛋白的表达水平。  结果:(1)Morris水迷宫结果:与C组比较,P组各亚组(P4、P8亚组)相同日龄子鼠逃避潜伏期均出现明显延长(p﹤0.05)。P4、P8亚组间相同日龄子鼠逃避潜伏期虽无明显差异(p>0.05),但P8亚组逃避潜伏期的延长较P4组出现更早且延续时间更长。P4亚组和P8亚组子鼠水迷宫实验第七天穿越平台的次数分别为1.83±0.41和1.73±0.57次,均明显较C组相同日龄子鼠(2.68±0.53次)少(P<0.05)。P4亚组和P8亚组子鼠水迷宫实验第七天在目标所在象限(第二象限)的活动时间分别为26.19±2.84和24.77±3.41s,均明显较 C组子鼠(29.67±4.02s)短(P<0.05)。与P4组比较,P8组相同日龄子鼠穿越平台次数和第二象限活动时间虽然有递减趋势,但无统计学差异(p>0.05)。  (2)子鼠海马组织学习记忆相关蛋白表达结果:P4亚组与P8亚组子鼠海马组织KIF17蛋白表达水平分别为0.457±0.029和0.401±0.016,均明显低于 C组(0.783±0.018)(p﹤0.05)。KIF17表达水平随着麻醉时间的延长而下降,表现为P4亚组表达水平低于P8亚组(p﹤0.05)。P4亚组、P8亚组子鼠海马组织NR2B总蛋白表达水平分别为0.674±0.033和0.663±0.033,均略低于 C组子鼠0.698±0.018,但无统计学意义(p>0.05)。P8组海马组织 NR2B膜蛋白表达水平(0.230±0.029)明显低于P4组(0.428±0.041)(P<0.05),且两者均显著低于C组(0.610±0.020)(p﹤0.05)。  (3)相关性分析结果:海马组织NR2B总蛋白表达水平与KIF17蛋白表达水平呈正相关(r=0.489,p=0.04)。海马组织 NR2B膜蛋白表达水平与 KIF17蛋白表达水呈正相关(r=0.877,P=0.000)。NR2B膜蛋白表达水平与子鼠第二至第五天逃避潜伏期均呈负相关(r>0.5,p﹤0.05),而与穿越平台次数(r=0.740,P=0.001)及原平台所在象限停留时间(r=0.585,P=0.011)均呈正相关。  结论:在本实验条件下,孕中期母体接受丙泊酚麻醉对SD大鼠子代的学习记忆功能有损害作用,且呈一定的时-效关系。丙泊酚对SD大鼠子代学习的损害,与其抑制子代海马区KIF17蛋白的表达从而减少学习记忆正调控因子NR2B向细胞膜转运有关。但其上游及下游机制有待进一步研究。
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