【摘 要】
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我们建立了一种基于错配杂交,采用酶联免疫或化学发光进行检测的基因突变鉴定方法.针对每个多态位点设计两根寡核苷酸探针,两根探针的区别仅在于突变位点处一个碱基,即分别与
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我们建立了一种基于错配杂交,采用酶联免疫或化学发光进行检测的基因突变鉴定方法.针对每个多态位点设计两根寡核苷酸探针,两根探针的区别仅在于突变位点处一个碱基,即分别与野生型和突变型DNA片段完全匹配.每个样品分别与两根探针进行杂交,以酶联免疫或化学发光法检测杂交产物.在合适的杂交条件下,完全匹配与不完全匹配的杂交产物稳定性不同,利用二者的杂交信号强度之比确定基因型.我们将此方法应用于细胞色素P4501A1基因两个多态位点的检测,证实了其实际应用的可行性.苯并(a)芘是一种已知的环境致癌物质,是肺癌发生的直接原因,其造成的DNA损伤主要通过NER途径修复.我们采用一肺腺癌细胞株作为研究对象,以不同浓度的苯并(a)芘处理细胞.结果表明低剂量苯并(a)药(1μM)可以诱导细胞NER基因表达上升,细胞DNA损伤程度较轻;高剂量苯并(a)芘(10μM)抑制细胞NER基因表达,细胞DNA损伤严重.因此,NER基因表达水平可以评价DNA修复能力,作为肺癌易感性的检测指标.
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