森林表土迁播后三种植物根内生微生物多样性变化

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内生微生物存活于植物组织内部,能够改善植物对养分的吸收,促进植物生长,增强植物对干旱等胁迫环境的抗性,对于干旱贫瘠地区植被的恢复具有重要意义。喀斯特石漠化是我国西南地区最为严重的生态环境问题,通过表土迁播技术实现石漠化地区的植被恢复是石漠化生态建设的主要措施之一。表土迁播后,光照和水分对植物生长有着明显影响,但对内生微生物的影响还未知,内生微生物与植物长势之间的联系也有待揭示。本研究中,基于可培养和免培养法,揭示了光照和水分对迁播后一年生的白枪杆(Fraxinus malacophylla)、乌桕(Sapium sebiferum)、铁橡栎(Quercus baronii)的内生真菌群落组成的影响;基于免培养法,揭示了光照和水分对两年生的铁橡栎根内生真菌和细菌群落组成的影响。主要研究结果如下:1.可培养法分析三种植物内生真菌多样性从不同处理条件下和次生林生长的三种植物根内分离到44个属的真菌,共有属包括镰刀菌属(Fusarium)、黑团孢属(Periconia)、间座壳属(Diaporthe)、枝孢属(Cladosporium)、链格孢属(Alternaria)、木霉属(Trichoderma)、拟茎点霉属(Phomopsis)以及刺毛茎点霉属(Setophoma)的真菌。但分离到的真菌均未产孢,无法鉴定到种。2.免培养法分析光照对植物内生微生物群落组成的影响(1)光照对一年生的三种植物内生真菌群落组成的影响基于免培养法对补水量相同时,不同减光处理的一年生三种植物根内生真菌多样性进行分析,共检测到7门22纲56目99科133属的内生真菌,总的属的数量约是可培养真菌的4倍。综合三种植物一起分析发现,次生林的Alpha多样性最高,其次是减光25%的样地,75%减光的样地多样性最低;不减光和减光50%的样地与次生林相同的OTUs分别是97.48%和97.2%,说明种子或表土把绝大部分真菌带到了石漠化迹地。光照对三种植物根内生真菌的影响略有差异,白枪杆在减光25%的样地多样性较高;乌桕和铁橡栎都是在不减光时多样性最高,铁橡栎的甚至超过次生林。(2)光照对两年生的铁橡栎内生真菌群落组成的影响基于前期补水对植物生长的影响慢慢减弱,在不考虑补水的情况下,进一步检测光照对两年生根内生真菌群落组成的影响。通过对四水平光照处理下的铁橡栎根内生真菌进行高通量测序,经数据优化后得到有效序列共809494条,序列长度平均为349.42 bp,聚类为121个OTUs,共检测到2门10纲17目21科22属的真菌。Alpha多样性显示,减光50%样地的多样性最高,但仍低于次生林。和一年生的铁橡栎相比,内生真菌的物种多样性降低,说明在表土迁播两年后,随着植物长势的减弱,内生真菌也变少。3.水分对一年生植物根内生真菌群落组成的影响通过对减光50%、不同补水处理的样地中一年生白枪杆、乌桕、铁橡栎根部的15个样本根内生真菌进行高通量测序,共检测到7门22纲53目98科126属的内生真菌。补水量为163 L/m~3时,总植物根内生真菌多样性最高,其他几个处理相差不大,但都比次生林的物种减少了许多。4.光照对内生细菌群落组成的影响分析对两年生铁橡栎根部的24个样本16S r RNA V4区域进行高通量测序,经数据优化后得到有效序列共795442条,序列长度平均为297.13 bp,聚类为718个OTUs,共检测到17门26纲54目92科170属的细菌。变形菌门(Proteobacteria)是不同样地中根内生细菌的共有优势门,雷尔氏菌属(Ralstonia)、嗜糖假单胞菌属(Pelomonas)、慢生根瘤菌属(Bradyrhizobium)是铁橡栎根内生细菌中的共有优势属。不同于真菌群落的是,铁橡栎根内生细菌Alpha多样性在50%减光的样地中最高。
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