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本试验应用聚合酶链式反应技术进行牛早期胚胎的性别鉴定,就PCR引物检测、胚胎DNA样品扩增、胚胎的切割取样量对胚胎生活力的影响及鲜胚移植情况等方面进行了研究,另外,探讨了4种体外培养系统对牛体外受精胚胎性比的影响。结果表明: 1、用y-染色体特异性引物扩增比利时兰白花公牛与中国荷斯坦奶牛的血液白细胞DNA样品,公牛的血液样品扩增产物出现一条明显的226bp的条带,检测并证明了本研究所采用雄性特异性引物的可靠性。 2、以牛血液DNA样品为阳性对照,蒸馏水为阴性对照,用一对y-染色体特异性引物成功地对胚胎DNA样品进行了扩增;同时,引入一对常染色体引物,有效地防止了由于胚胎样品丢失等原因形成的假阴性现象。 3、经4种不同体外培养系统比较发现,添加5%FCS的改良SOF液中受精卵的卵裂率达84.2%,并且添加血清的mSOF液和M199+GCM共培养系统的囊胚发育率显著高于不添加血清的2组培养系统的囊胚发育率,因此添加血清的mSOF液比较适合受精卵的体外发育培养。 4、添加血清的两组培养系统中所得雄性囊胚与雌性囊胚的性比虽偏离了1:1的性比,但差异并不显著(P>0.05),而总的体外胚胎的性比则显著偏离了1:1的性比(P<0.05)。这说明在体外培养系统中雄性胚胎与雌性胚胎发育能力更强,并且血清的存在对于雄性胚胎的发育有明显的促进作用。 5、胚胎切割取样的细胞数量与取样后胚胎的继续发育能力有着密切联系。本研究结果表明,切取10%~20%细胞的胚胎比徒手二分割取样的胚胎继续发育能力显著提高(P<0.05)。 6、性别鉴定后胚胎的移植结果显示,犊牛性别与胚胎性别鉴定结果完全符合,移植总妊娠率为28.8%。