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目的研究骨髓间充质干细胞分泌的胞外囊泡(BMSC-EVs)对RSC96雪旺细胞增殖和迁移的影响及可能的作用机制,为周围神经损伤的治疗修复提供新思路。方法(1)采用大鼠全骨髓贴壁法分离纯化骨髓间充质干细胞。(2)通过超速离心法分离BMSC-EVs并进行鉴定。(3)CM-Dil(红色荧光染料)标记的BMSC-EVs与RSC96细胞孵育4h,观察EVs与RSC96膜融合情况。(4)MTT和平板克隆实验观察BMSC-EVs对RSC96细胞增殖的影响。(5)利用划痕实验和Transwell实验观察BMSC-EVs对RSC96细胞迁移的影响。(6)流式分析检测BMSC-EVs对RSC96细胞凋亡的影响。(7)Western-blot检测相关蛋白的变化。(8)MTT实验、Transwell实验和Western-blot检测用ERK抑制剂U0126和BMSC-EVs共同处理RSC96细胞后,其增殖、迁移的变化和相关蛋白表达的改变。结果(1)成功分离BMSC。结果表明,BMSC的形态为长梭形和漩涡样生长;流式细胞表面标记的结果为CD29,CD90,CD105为阳性,CD19为阴性。在成骨诱导后,它是阳性的,并且在成脂诱导后也出现脂滴。(2)BMSC-EVs粒径范围在80-400nm,平均是142nm。用TEM观测,可以看到圆形或类圆形的膜状结构。(3)CM-Dil标记实验证实BMSC-EVs可与RSC96细胞膜发生融合。(4)MTT和平板克隆实验结果表明,BMSC-EVs可抑制RSC96细胞的增殖。(5)划痕实验和Transwell实验结果显示出BMSC-EVs可抑制RSC96细胞的迁移能力。(6)Western-blot结果显示BMSC-EVs处理后Bcl-2蛋白水平下调,而Bax蛋白水平上调。(7)流式细胞仪检测结果显示BMSC-EVs可诱导RSC96细胞的凋亡。(8)BMSC-EVs可以激活RSC96细胞的ERK活性,促使Bcl-2的下调增加,Bax的上调减少,RSC96细胞的增殖和迁移受到抑制。结论BMSC-EVs通过激活ERK途径抑制RSC96细胞的增殖和迁移并诱导细胞凋亡。