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目的脂类代谢异常常表现为血中胆固醇、甘油三酯、载脂蛋白含量改变,与动脉粥样硬化、高脂血症、糖尿病的发生均有一定关系,体内脂类代谢受胰岛素、胰高血糖素、饮食营养、体内生化酶活性的复杂调控。邻苯二甲酸二乙基己酯(Diethyl hexylphthalate,DEHP)和双酚A(BisphenolA,BPA)均是化工行业常用的原材料。研究显示,二者具有内分泌干扰作用,对机体多个组织、器官或系统造成危害,增加内分泌系统、免疫系统、神经系统和生殖系统疾病的患病风险。因DEHP和BPA工业制品在生活中的广泛应用,在孕妇及儿童体内也能检测到两种物质及其代谢产物,其对健康影响应得到重视。肝脏作为体内重要代谢器官,是各种化学物的首要靶点和代谢场所,因此,研究化学物对肝脏的损害及其相应机制,意义重大。鉴于此,本研究建立初断乳大鼠DEHP和BPA混合接触动物模型,动态观察脂代谢指标变化情况,并从肝脏氧化应激角度探讨脂代谢异常的机制,并观察混合染毒与单独染毒的毒性差异,为更好地保护人群健康提供毒理学依据。方法4周龄无特定病原体级(SPF)健康SD雄性大鼠96只,按照体重随机分成四组,每组24只。分别为阴性对照组、DEHP750 mg/kg组、BPA100 mg/kg组和DEHP 750 mg/kg+BPA 100 mg/kg组,用玉米油配制成相应浓度,阴性对照组给予溶剂玉米油,以5 ml/kg容积连续灌胃染毒6周,每周7 d,1次/天。分别在染毒后第1周、第3周、第6周每组处理8只动物。分离血清检测血脂水平和脂代谢酶活性,取肝脏进行总脂酶、氧化应激指标检测、组织病理学观察、PPARγ、SOD3和GPx mRNA表达检测。在整个实验期间观察大鼠的生长发育等情况变化。生化试剂盒测定血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(L DL-C)和高密度脂蛋白(HDL-C)含量;肝脏中总脂酶:脂蛋白脂酶(LPL)和肝酯酶(HL);肝脏氧化应激指标:丙二醛(MDA)、过氧化氢(H2O2)、谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)水平。ELISA试剂盒测定血清激素敏感性脂肪酶(HSL)和卵磷脂胆固醇转移酶(LCAT)。RT-PCR法检测脂代谢关键基因PPARy以及抗氧化基因SOD3和GPx的表达。结果1.一般状况:从第2周开始,DEHP组和混合染毒组大鼠体质量增长均显著低于对照组;大鼠肝脏脏器系数在三个阶段DEHP组和混合染毒组显著高于对照组,差异有统计学意义(p<0.05)。2.病理检测:染毒第6周DEHP组出现肝细胞坏死,BPA组肝细胞胞浆呈空泡样变,混合染毒组出现严重的炎细胞浸润。3.血清学指标:TC含量第1周在BPA组和混合染毒组升高,第6周3个剂量组均增加;TG含量第1周和第3周DEHP组、混合染毒组降低,第6周仅DEHP组降低;LDL-C含量第1周BPA组及混合染毒组降低、第6周混合染毒组增加;HDL-C含量第1周混合染毒组降低、第3周DEHP组和混合染毒组降低、第6周3个剂量组降低(p<0.05)。HSL含量第1周和第6周3个剂量组均下降;LCAT含量第3周BPA组和混合组降低,第6周3个剂量组均下降(p<0.05)。4.肝脏总脂酶及关键基因表达:LPL活性第3周DEHP组和BPA组增加,第6周3个剂量组均下降;HL活性第1周混合组降低,并低于两单独染毒组,第3周和第6周DEHP组和混合组降低,且混合组低于BPA组(p<0.05)。PPARγ mRNA表达水平第3周混合染毒组、第6周DEHP组和混合染毒组均下降,且第3周混合染毒组低于两单独染毒组(p<0.05)。5.肝脏氧化应激及相关基因水平:MDA含量第6周BPA组和混合染毒组升高;H202含量第6周3个剂量组均升高;GSH含量第1周混合染毒组、第3周和第6周混合染毒组、DEHP组均升高;SOD活性第3周DEHP组和混合染毒组、第6周3个剂量组均显著降低;GSH-Px活性第1周混合组升高、第3周和第6周3个剂量组均显著降低;CAT活性第6周DEHP组和混合组升高(p<0.05)。SOD3 mRNA第3周和第6周DEHP组和混合染毒组下降,且混合染毒组低于BPA组;GPx mRNA第6周3个剂量组下降(p<0.05)。6.血脂水平与氧化应激关系:TC含量在第1周、第3周、第6周分别与MDA含量、H202含量及GSH含量呈正相关,第6周则与SOD和GSH-Px活性呈负相关;TG含量在3个阶段与GSH含量均呈负相关,但与GSH-Px活性第1周正相关、第3周负相关;LDL含量第1周与GSH-Px、GSH呈负相关,第3周与GSH呈正相关,第6周与CAT呈负相关;HDL含量第1周与MDA、GSH-Px呈负相关,第3周与SOD呈正相关,与GSH呈负相关,第6周与GSH-Px、SOD呈正相关,与GSH呈负相关。结论1.DEHP和BPA单独及混合染毒干扰大鼠的正常发育,大鼠肝脏出现肝细胞坏死、胞浆空泡样变、炎细胞浸润等病变。2.DEHP和BPA致大鼠体内血脂水平异常,脂代谢关键基因PPARγ表达受到抑制,血清和肝脏脂代谢相关酶活性降低;肝脏过氧化物增多,抗氧化酶活性下降,抗氧化基因SOD3和GPx受到抑制。3.混合染毒组DEHP和BPA有交互作用,较单独染毒组血脂指标和氧化应激指标均不同程度出现增强或减弱。4.DEHP和BPA对大鼠脂代谢的影响,与其抑制SOD3、GPx基因表达致氧化应激紊乱有关。