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背景肾癌又称肾细胞癌(renal cell carcinoma RCC)是成人肾脏最常见的恶性肿瘤,占成人恶性肿瘤2%-3%,在男性和女性恶性肿瘤中分别排第7位和第9位。在全球范围内,每年大约新发病例27万,其中12万死亡,在我国,肾癌的发病率在泌尿系肿瘤中仅次于膀胱癌,并在过去20年中以每年6%速度递增。病理土肾癌可分为：透明细胞癌、肾乳头状癌、嫌色细胞癌、集合管癌及未分化癌。其中透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma ccRCC)是最常见的病理类型,起源于近曲小管上皮细胞,且易发生转移,占转移性肾癌的80%-85%。肾癌对放疗及化疗均不敏感,手术切除仍是目前最佳的治疗手段,但术后复发率约为20%-40%。由于肾癌的化疗及放疗抵抗性,因此临床上没有有效的术后治疗手段。综合肾癌的表现、病理及临床过程认为他是一种异质性疾病,此外缺乏早期发现及及后继随访的生物标志物,因此及时诊断和随访肾癌进展十分困难。鉴于此,从分子及基因学水平阐释肾癌的发生、发展机制,并寻找帮助肾癌早期诊断及预测术后发生早期转移的生化指标和潜在的治疗靶点成为现在急需解决的问题。人类MiR-143位于第5号染色体5：148808481～148808586。目前miRNA表达谱的分析已证实MiR-143在多种恶性肿瘤,如食道癌、结直肠癌、膀胱癌、乳腺癌、前列腺癌等中低表达,推测其可能与肿瘤普遍相关,在肿瘤发生过程中具有重要作用。体外研究中,上调miR-143表达后可以抑制肿瘤细胞的生长并诱导细胞凋亡,提示其参与肿瘤细胞的增殖、分化、凋亡等一系列生物学过程。此外,miR-143可以增加胃癌和结肠癌细胞对化疗药物的敏感性,并且经过化学修饰的miR-143可作为抗肿瘤药物治疗人类肿瘤,提示miR-143可能是潜在的肿瘤生物标志物及治疗靶点。最新研究显示在头颈部鳞状癌、肺癌、乳腺癌等肿瘤中miR-143可以通过靶向调节HK2(hexokinase2)基因而影响肿瘤细胞的生长、转移等。其还可通过调节PI3K/Akt和MAPK信号传导通路而影响膀胱癌增殖、凋亡等生物学行为。通过肾癌中miRNAs表达谱分析发现,miR-143在肾癌细胞中低表达,并且在复发性肾癌患者当中降低水平更为显著,推测其可能与肾癌的发生发展相关,鉴于此本实验重点研究niR-143mimics对肾癌细胞株生物学行为增殖与凋亡的影响,并通过靶基因预测软件miRecords、TargetScan、Pictar结合既往文献关于miR-143靶基因的文献,预测miR-143在肾癌中的靶基因可能为Bc12,初步探讨miR-1432对肾癌细胞的影响及机制。目的研究miR-143对肾癌细胞株增殖及凋亡的影响及其机制。方法人工合成miR-143模拟物(miR-143mimics)及Negative control转染对照序列,用lipofectamine TM2000旨质体瞬时转染miR-143模拟物及Negative control转染对照序列至肾细胞癌株A498中,实验分为3组：miR-143mimics转染组Negative control转染组(NC组),空白对照组(Opti-MEM I无血清培养基培养的A498细胞)。采用CCK-8和流式细胞技术等方法检测转染后不同分组肾癌细胞株生长、增殖与凋亡的变化。运用miRecords、TargetSca、Pictar靶基因预测软件结合既往关于miR-143的靶基因文献预测miR-143的靶基因可能为Bc12,使用real-time PCR及western-blot验证miR-143对靶基因Bc12表达的影响情况。结果CCK-8检测结果显示miR-143mimics转染组细胞增殖抑制明显,流式细胞仪检测结果显示miR-143mimics转染组细胞凋亡率增加(9.10±2.31)%,显著高于Negative control转染组(4.23±1.52)%与空白对照组(3.43±1.61)%,组间差异有统计学意义(P<0.05)。real-time PCR及western-blot结果显示,较NC转染组及空白对照组相比,miR-143mimics转染组Bc12mRNA表达无明显差异(P>0.05),Bc12蛋白表达明显下调(P<0.05)。结论1MiR-143mimics可以抑制肾癌细胞A498的增殖并诱导其凋亡；2miR-143mimics对肾癌细胞生物学行为的影响可能是通过调节凋亡抑制基因Bc12转录后的表达而实现的；3miR-143mimics有望成为新的肾癌治疗药物,其临床应用有待于进一步的研究。