禽源流感病毒NP蛋白核质穿梭机制及IFIT家族基因功能研究

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A流感病毒是造成人类及动物流行性感冒的有囊膜的单股负链RNA病毒,由8个RNA片段构成,可编码14种病毒蛋白。目前认为HA和NA蛋白在决定流感病毒宿主适应性方面有着重要的作用,而流感病毒的vRNP复合物作为病毒的核心,参与流感病毒感染的多个过程。A型流感病毒的核蛋白NP作为vRNP复合物的重要组成部分,其本身可以穿梭于细胞质和细胞核之间,在流感病毒的复制、感染力、跨种间传播等方面发挥着重要作用。研究发现与WSN毒株相比,禽源流感病毒H7N9的NP蛋白更倾向于细胞质滞留且出核现象更加明显。通过序列比对发现了两个影响NP蛋白定位的关键氨基酸位点,分别是位于核定位信号区(NLS1)的第4位氨基酸和核输出信号区(NES3)的第253位氨基酸。进一步研究表明,关键位点的突变可以改变NP与核运输蛋白CRM1和Importin-α的结合能力,这从机制上解释了H7N9 NP蛋白细胞质滞留的原因,同时关键位点也在提高vRNP活性和影响病毒生长周期方面发挥重要作用。以上结果表明,禽源H7N9流感病毒Q4和I253通过改变NP与核运输蛋白的结合力,进而影响了NP蛋白细胞定位,并在流感病毒复制中发挥重要功能。IFIT(Interferon induced proteins with tetratricopeptide repeat)家族基因是一组较早发现的干扰素刺激基因,它在抗病毒和免疫调节中发挥了重要作用。为研究IFIT家族基因抑制A型流感病毒复制的机理,利用高通量RNA深度测序(RNA-Seq)技术发现A型流感病毒WSN毒株感染293T细胞后,IFIT家族基因均出现明显上调。同时发现在IFIT2、IFIT3过表达后,流感病毒的复制和转录均有明显下调,并对vRNP聚合酶活性具有剂量依赖型的抑制作用。进一步研究证明IFIT2、IFIT3编码蛋白与流感病毒非结构蛋白(NS1)存在细胞内共定位,证明二者存在相互作用的可能。综上所述,IFIT家族基因成员)(IFIT2,IFIT3)可以抑制A型流感病毒的复制和转录,有助于进一步阐明宿主因子对流感病毒感染的调节机制。  本文研究了新型生物制剂与枯草芽孢杆菌联用对肉鸡生长性能及肉品质的影响,发现试验组与对照组仔鸡各阶段的日采食量、料重比及21日龄鸡的日增重均差异不显著(P>0.05),而胸肌肉色(b*)、腿肌pH24h差异显著(P<0.05),21日龄成活率、胸肌pH24h、腿肌肉色(b*)、剪切力、滴水损失差异极显著(P<0.01)。这些结果说明,添加新型生物制剂与枯草芽孢杆菌联用更利于肉鸡养殖,为家禽的绿色健康养殖提供了一种新的饲养理念。
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