荧光假单胞杆菌F091控制作物青枯病的生物防治研究

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植物细菌性青枯病是由青枯劳尔氏菌(Ralstonia solanacearum)引起的一种毁灭性土传病害,是造成茄科、瓜类、蚕桑生产大面积减产的原因之一,严重制约种植业发展。为更好地利用生物防治的方法控制不同作物上的青枯病,本研究通过大量筛选,从分离获得的569株细菌菌株中筛选到35株对R. solanacearum有拮抗能力的菌株,同时利用其中离体拮抗效果较好的16株进行番茄植株活体筛选。结果显示F091对4种不同青枯菌生化型均有较强的拮抗能力,且在活体上具有稳定的防治效果。经菌落形态等细菌学特征观察、Biolog鉴定、脂肪酸测定(FAMEs)及16S rDNA序列分析,将该菌株鉴定为荧光假单胞杆菌(Pseudomonas fluorescens)。为研究F091的拮抗活性,以该菌的菌悬液为对照,分别测定无菌滤液、蛋白酶K及高温热处理后拮抗物质抑菌活性的变化,同时初步提取该抑菌物质。结果显示,蛋白酶K及高温热处理后,该菌的抑菌活性显著降低,表明其主要抑菌成分为蛋白类物质。其中利用50%低温乙醇沉淀得到的蛋白具有最大的抑菌效果,SDS-PAGE检测得出其分子量约为30-35 kDa。目前番茄的规模化生产以温室大棚为主,因此为明确F091的防病效果,本研究亦在温室条件下进行了该菌的防效评价。结果显示,F091的菌悬液处理能有效控制番茄青枯病的发生,其防治效果达75.0%;同时F091能增加感病番茄植株的生物量,间接证明该菌株能提高番茄作物对青枯病的抗病性;而番茄根围土壤中青枯菌的种群数量明显受到该菌的影响,说明青枯菌在土壤中的生长受到F091的抑制。可见F091在防治青枯菌方面具有很大的潜力和广阔的应用前景。
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