弓形虫多价亚单位疫苗免疫保护性的研究

来源 :山东省医学科学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:spendtime
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该研究应用SDS-PAGE电泳对弓形虫体粉碎抗原进行分离、纯化,选择特异性抗原组分进行配伍,然后与福氏完全佐剂混合免疫小鼠,通过免疫学检测评价抗原刺激机体产生的免疫水平,并根据免疫鼠抵抗弓形虫感染情况,评估弓形虫抗原组合的免疫保护作用.结果发现,弓形虫RH株虫体抗原SDS-PAGE电泳显示有7条特异抗原蛋白带,对其中4条(P67、P35、P30、P22)分离纯化配伍后分别免疫小鼠,发现各实验组小鼠脾脏CD<,4><+>、CD<,8><+>T淋巴细胞及其培养液中IL-2、IFN-γ的滴度均随免疫时间延长而增加,其中以P30/35配伍组增高最显著,并且该组合诱导的保护力也最强,攻击感染后平均存活时间明显长于其他实验组和对照组(P<0.05),表明P30/35蛋白组合的免疫原性较强,可作为弓形虫亚单位疫苗的候选抗原.筛选出抗原后,又对亚单位疫苗必须的免疫佐剂进行了优化,用无毒副作用的拟菌颗粒、脂磷壁酸、蜂胶分别和弓形虫P30/35特异蛋白组分混合、碾磨、免疫小白鼠,并以福氏完全佐剂作对照,观察佐剂效果.结果显示拟菌颗粒佐剂能显著增强弓形虫P30/35抗原刺激机体产生的细胞免疫、体液免疫和免疫保护力.拟菌颗粒佐剂组小鼠产生的IL-2较福氏完全佐剂稍低,但明显高于其它实验组和对照组(P均<0.01);IFN-γ和CD<,4><+>、CD<,8><+>T淋巴细胞计数与福氏完全佐剂比较无显著性差异(P均>0.05),产生的IgG抗体水平则显著高于福氏完全佐剂组(P<0.01),并且拟菌颗粒辅助P30/35抗原抵抗弓形虫攻击感染后的存活时间比无佐剂辅助的P30/35抗原对照组延长79.8%,也与福氏完全佐剂组相比无显著性差异,而脂磷壁酸和蜂胶的佐剂效果与拟菌颗粒和福氏完全佐剂相比较差(P均<0.01),显示拟菌颗粒佐剂具有提高P30/35抗原的免疫原性和增强免疫应答的良好作用.将筛选的弓形虫P30/35抗原与拟菌颗粒佐剂制成的多价亚单位疫苗免疫小鼠,结果显示该疫苗能较好地提高机体的细胞免疫和体液免疫水平,该疫苗免疫的小鼠抵抗弓形虫攻击感染的存活时间比空白对照提高了132.6%,具有较好的免疫保护力.
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