【摘 要】
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牙周炎是导致成年人牙齿丧失的主要原因之一,发病率高,目前牙周炎的治疗旨在控制疾病的进展并降低牙齿脱落的风险。牙周炎的常规治疗方法,如基础治疗、局部和全身用药、手术治疗等,可以降低牙周细菌的水平,传统的抗菌药物虽然可以提高牙周炎的治疗效果,但容易产生耐药性、菌群失调等副作用。因此,寻找一种药食同源、无毒副作用的替代疗法是未来牙周病研究发展的趋势。大量研究证明,辣木叶提取物可减缓多种炎症性疾病的进展,
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牙周炎是导致成年人牙齿丧失的主要原因之一,发病率高,目前牙周炎的治疗旨在控制疾病的进展并降低牙齿脱落的风险。牙周炎的常规治疗方法,如基础治疗、局部和全身用药、手术治疗等,可以降低牙周细菌的水平,传统的抗菌药物虽然可以提高牙周炎的治疗效果,但容易产生耐药性、菌群失调等副作用。因此,寻找一种药食同源、无毒副作用的替代疗法是未来牙周病研究发展的趋势。大量研究证明,辣木叶提取物可减缓多种炎症性疾病的进展,如结肠炎、肾炎等,具有较好的抗炎及抗菌作用。最新研究提出辣木叶水提取物隐绿原酸具有抗炎作用,但具体机制不清楚。本次研究拟分别建立牙周炎细胞及动物模型,首次研究隐绿原酸在实验性牙周炎中是否具有抗炎及抗骨吸收作用,并初步探讨其机制。目的:通过体内外实验研究隐绿原酸在实验性牙周炎中的抗炎和抗骨吸收作用及其作用机制。方法:1.培养巨噬细胞系RAW264.7,用不同浓度梯度（0μM-160μM）的隐绿原酸处理24h,CCK8检测细胞活力;选取合适浓度的隐绿原酸（10μM和40μM）和1μg/ml的LPS共培养24h,qRT-PCR法检测各组炎症因子IL-6、IL-1β、TNF-a、IL-10及骨保护系统RANKL/OPG的表达情况;Western blot法检测各组p-p38/p38及骨保护系统RANKL/OPG的表达水平。2.建立牙周炎动物模型,分为5组,空白对照组,牙周炎组,隐绿原酸组,p38 MAPK抑制剂SB203580组,隐绿原酸+p38 MAPK抑制剂SB203580组。1个月后处死,HE染色检测药物对各脏器的毒性作用;扫描Micro-CT测量牙槽骨吸收情况,qRT-PCR法检测炎症因子的表达;Western blot法检测各组p-p38/p38及骨保护系统RANKL/OPG的表达水平。结果:1.体内外实验发现隐绿原酸在合适的浓度范围内,对RAW264.7细胞及实验性大鼠的毒性作用小。2.体内外实验证明隐绿原酸可以抑制促炎因子IL-6、IL-1β、TNF-a的表达,促进抗炎因子IL-10的表达,且高浓度的隐绿原酸抗炎效果较好。3.不同浓度的隐绿原酸在体内外均能抑制RANKL/OPG的表达,Micro-CT扫描大鼠牙槽骨发现隐绿原酸能减少牙槽骨的吸收,具有骨保护作用。4.体内外实验均发现隐绿原酸可以下调p-p38/p38的表达,且隐绿原酸的抗炎和骨保护作用可能与抑制p38 MAPK信号通路活化有关。结论:隐绿原酸具有抗炎及抗骨吸收作用,且其作用可能与抑制p38MAPK信号通路活化有关。
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