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本研究的目的:是探究hAMSCs和hAECs分化成为血管内皮细胞的能力,为其作为组织工程血管种子细胞和治疗血管性疾病的供体细胞提供实验依据。
方法:采用机械法和胰酶-胶原酶分段消化法从人羊膜组织中得到hAECs和hAMSCs,流式细胞仪(flow cytometry,FCM)进行细胞表型鉴定。分别以高糖和低糖的DMEM两种含糖量不同的培养基培养hAEC和hAMSCs传至第三代,用含有50ng/ml VEGF、10ng/ml bFGF的2%FBS诱导培养基定向诱导分化,hAECs和hAMSCs均设诱导组和对照组,诱导组下设高糖组和低糖组;对照组为仅含有10%FBS的基础培养基。诱导组和对照组于第8d,采用RT-PCR检测内皮细胞标志物KDR mRNA和vWF mRNA的表达,用FCM分别检测其血管内皮细胞表型分子标志CD54、CD31和CD34的表达。同时进行细胞的形态观察。
结论:在本实验条件下,bAMSCs和hAECs均可定向诱导分化成血管内皮细胞,提示hAMSC和hAEC可能成为组织工程器官血管化种子细胞和血管损伤治疗供体细胞的新的细胞资源。