论文部分内容阅读
目的：通过比较去甲肾上腺素诱导HSP70的表达对隐睾症大鼠生殖细胞凋亡的影响,探讨去甲肾上腺素对隐睾症的治疗作用与机制,为隐睾症的临床治疗提供理论实验依据。方法：22日龄雄性SPF(specific pathogen-free animal)级SD大鼠96只,体重40-55g,经随机数字表处理后随机分为3组：空白组A组(n=32)空白对照组,不采取任何干预措施；剩余两组建立单侧隐睾模型后分别施予不同干预措施,隐睾模型组B组(n=32)隐睾模型生理盐水处理组(按5ml/kg/d剂量腹腔注射给药)；隐睾模型药物处理(用生理盐水配成O.1mg/ml,按0.5mg/kg/d剂量腹腔注射给药)组C组(n=32)。并于建立模型后的当天,第5,10,15d按随机的方法取出各组SD大鼠8只心脏穿刺采血3ml,作血清抗体分析用,然后断颈处死SD大鼠迅速取出隐睾侧睾丸称重后,按常规方法石蜡包埋固定,标记后留做HE染色观查并检测曲细精管生育力指数(tubular fertility index, TFI)、平均曲细精管直径(mean tubular diametar, MTD),免疫组化,凋亡检测用。结果：(1)各组大鼠隐睾侧睾丸重量的变化：睾丸手术后5d时,B组睾丸重量就明显下降(P<0.05),随后持续下降,到15d时睾丸重量仅为A组的35%。C组变化较小,10d开始下降,与A组、B组的差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)各组大鼠血清抗精子抗体(AsAb)IgG、IgA、IgM定量测定：睾丸手术后5d时,B组睾丸IgG和IgA水平开始升高(P<0.05),且随着时间的延长,升高越明显；而B组睾丸IgM水平手术后5d时就明显上升(P<0.05),10d后开始下降。C组变化较小与A组、B组的差异均有统计学意义(P<0.05),IgG和IgA水平手术后5d时升高不明显,无统计学意义(P>0.05),10d后开始上升,与A组、B组比较,有统计学意义(P<0.05),与A组、B组比较,有统计学意义(P<0.05),但升高水平较B组低,而IgM水平手术后5d时就明显上升(P<0.05),后随时间延长逐渐降低。(3)各组大鼠组织学观察：B、C组MTD与TFI在手术后5d明显降低,与A比较组有统计学意义(P<0.05), C组术后10d后MTD与TFI有所升高,与A组和B组比较,有统计学意义(P<0.05)。(4)各组大鼠细胞凋亡水平变化：B组于隐睾模型建立后在5d时就凋亡明显增加(P<0.05),且随时间的延长逐渐增加,C组隐睾模型建立后在5d时就凋亡明显增加(P<0.05),且随时间的延长逐渐增加,但无B组明显,与A组、B组比较,均有统计学意义(P<0.05)；(5)各组大鼠Hsp70表达量变化：在A组睾丸组织中,Hsp70呈中等程度表达于精母细胞和精子细胞的细胞核内。B组Hsp70于隐睾模型建立后在5d时就明显减少(P<0.05),10d时减少达到高峰。到隐睾术后15d时,无明显Hsp70表达；C组Hsp70隐睾模型建立后在5d也明显减少(P<0.05),10d后Hsp70表达有所增加,与A组、B组比较,均有统计学意义(P<0.05)。结论：(1)去甲肾上腺素可抑制大鼠手术诱导隐睾后生殖细胞细胞凋亡；(2)去甲肾上腺素可上调大鼠手术诱导隐睾后生殖细胞HSP70的表达。