对乙酰氨基酚（Acetaminophen,APAP）的过量服用是药物性肝损伤和急性肝衰竭的主要原因之一,临床上APAP诱导肝损伤（Acetaminophen-induced liver injury,AILI）具有发病迅速、干预难度大等特点。唯一批准的药物N-乙酰-L半胱氨酸（N-acetyl-L-cysteine,NAC）抗氧化是AILI早期的主要治疗方法,但其治疗时间窗窄,延迟给药疗效欠佳。传统的APAP血药浓度、ALT和AST等生物标志物的应用仍面临依赖对APAP摄入时间的精准把控、早期诊断灵敏度不足和预测预后难度大等挑战。因此,挖掘潜在的AILI生物标志物和治疗靶点具有重要的临床意义。时间轴贯穿AILI发生和发展的全过程,无论是在患者临床特征还是治疗策略都具有明显的时间依赖性。在AILI的“代谢-损伤-炎症-修复”过程中,损伤和炎症至关重要,但两者的相互作用关系尚未被完全阐明。游离DNA（Cell-free DNA,cf DNA）作为损伤相关分子模式（Damage-associated molecular patterns,DAMPs）的重要组成,在细胞应激或损伤的情况下被释放到胞外,通过模式识别受体激活免疫细胞,触发炎症反应,作为重要桥梁介导了损伤和炎症的恶性循环和级联放大。虽然已有研究初步证实了cf DNA在AILI诊断和治疗中的应用潜力,但cf DNA在AILI中的时间变化模式及其与损伤和炎症的作用关系尚不清楚,且cf DNA作为AILI的生物标志物和治疗靶点的潜力还需进一步证实。为此,本论文提出两个关键科学问题:（1）cf DNA在损伤和炎症互作中的时间变化规律能否用于指导AILI的诊断和预测?（2）干预cf DNA能否联合NAC,通过降低损伤和炎症实现AILI的综合治疗?紧绕上述问题,本论文开展了如下研究:（1）cf DNA在AILI中的时间变化模式和作用研究通过检测AILI小鼠不同时间点损伤、炎症相关指标以及DAMPs的变化,证实了血清cf DNA的时间变化模式与肝脏坏死面积、血清ALT、AST和TNF-α等损伤和炎症指标的变化规律高度相关。通过流式细胞术证实了AILI小鼠外周血和肝脏中的中性粒细胞占比迅速上升,且外周血中的单核-巨噬细胞趋化至肝脏后经历从促炎向促修复的表型转换。通过cf DNA与中性粒细胞或巨噬细胞的双向清除实验,证实了中性粒细胞在AILI中发挥重要作用。（2）cf DNA作为AILI生物标志物的潜力研究通过检测健康人群、药物性肝损伤和酒精性肝病患者的血浆cf DNA水平,发现了高水平的cf DNA在肝损伤患者中的潜在临床应用价值。通过检测不同程度AILI小鼠的肝脏坏死面积、血清ALT和cf DNA水平,证实了cf DNA水平可用于评估AILI的严重程度。通过检测致死性重度AILI小鼠血清ALT和cf DNA水平并观察96 h死亡率,证实了血清cf DNA预测AILI小鼠死亡风险的能力与ALT相当,且两者联合的预测能力优于单一ALT。（3）DNaseⅠ联合NAC干预AILI的疗效研究在证实DNaseⅠ对AILI小鼠的治疗效果的基础上,联合给予DNaseⅠ和NAC可有效提高重度AILI小鼠的存活率,降低肝脏坏死、肝细胞凋亡、血清生化指标、氧化损伤、炎症因子以及DAMPs等损伤和炎症相关指标,且未见明显系统性毒副作用;证实了以cf DNA为靶点的治疗策略可显著提高AILI小鼠的存活率,减轻肝损伤和炎症,且联合NAC的综合治疗策略表现出更好的治疗效果。（4）AILI联合治疗策略的抗炎抗氧化机制探索通过流式细胞术证实了DNaseⅠ联合NAC可有效降低小鼠外周血中性粒细胞和单核细胞的比例,抑制肝脏中性粒细胞浸润和Kupffer细胞流失,促进巨噬细胞从促炎向促修复的表型转换。通过肝脏转录组学测序和免疫组化证实了DNaseⅠ联合NAC可调控AILI小鼠肝脏炎症和氧化应激相关的信号通路及其下游基因的表达。通过检测治疗后AILI小鼠肝脏和中性粒细胞TLR9表达以及体外HEK-Blue TMTLR9报告细胞的活化情况,证实了DNaseⅠ联合NAC可有效抑制TLR9的表达和活化,减轻AILI的损伤和炎症。综上,本论文揭示了cf DNA在AILI损伤和炎症互作过程中的时间变化模式和作用,为cf DNA在AILI中的应用提供了理论支撑;证实了cf DNA联合ALT在预测AILI小鼠死亡风险中的优势,为AILI的精准诊断和预后提供了的生物标志物和新模式;发展了以cf DNA为核心靶点的DNaseⅠ联合NAC策略,通过抗炎和抗氧化途径综合治疗AILI,为AILI的高效安全治疗提供了靶标和新范式。