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在全球范围内,真菌毒素污染是食品污染中典型的类型,发生在生产、加工、储存以及整个食物链过程,严重威胁着人类和动物的健康。真菌毒素的种类繁多、性质各异,其中常见的赭曲霉毒素包括赭曲霉A（OTA）和赭曲霉B（OTB）,OTA毒性最大在体内可代谢为赭曲霉alpha（OT-alpha）。伏马菌素有伏马菌素B1、B2和B3（FB1、FB2和FB3）,其中FB1和FB2在体内可水解生成水解伏马菌素B1和B2（HFB1和HFB2）。其中OTA、FB1已被列为2B类致癌物（IARC）。除此之外,链格孢菌毒素和新兴“镰刀菌”毒素是近几年新兴的真菌毒素,最重要的链格孢菌毒素包括细交链孢菌酮酸（TeA）、链格孢酚（AOH）、交链孢烯（ALT）、交链孢酚甲基醚（AME）和腾毒素（TEN）,新兴的“镰刀菌”毒素有恩镰孢菌素B（ENNB）、恩镰孢菌素B1（ENNB1）、恩镰孢菌素A（ENNA）、恩镰孢菌素A1（ENNA1）和白僵菌素（BEA）。研究发现,这些真菌毒素具有肾毒性、肝毒性、免疫抑制、致畸、致癌和致突变以及协同作用等毒性。本研究采用人类生物监测方法,开展了尿液中18种真菌毒素生物标志的检测方法建立、含量测定以及人群内暴露研究。1.本研究建立了尿液中18种真菌毒素生物标志物的固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱（SPE-UHPLC-MS/MS）)检测方法,采用不酶解和酶解分别检测游离态和总（游离态和葡萄糖醛酸结合态）真菌毒素。样品上清液经Oasis HLB固相萃取柱净化,洗脱液经氮吹复溶后进UHPLC-MS/MS测定,采用同位素稀释内标法定量。前处理回收率范围为71.6%-110.8%,定量限范围为0.0002-0.5 ng/m L,方法回收率范围为74.0%-132.9%,相对标准偏差小于13.4%。由此表明,该方法准确可靠、灵敏度高,适用于尿液样品中痕量真菌毒素生物标志物的测定。2.利用建立的检测方法测定了北京地区的60份尿液样品,检测结果表明,所有样品至少有一种真菌毒素检出,OTA的检出率最高,为91.7%;其次是TeA（86.7%）;酶解后AOH、AME、OT-alpha和ENNB的检出率明显提高,表明存在葡萄糖醛酸结合态代谢产物;TEN的检出率为38.3%,FB1和HFB1的检出率均低于3.3%,其他生物标志物低于检出限。统计分析结果表明OTA、OT-alpha、TeA、AOH、AME、TEN和ENNB暴露水平与性别差异没有显著性关联（P>0.05）,它们的游离态与总的暴露水平存在正相关性（P<0.05）。不同毒素间,TeA与TEN、OTA与AME、OT-alpha与TEN、AOH与ENNB的总真菌毒素含量之间存在相关性（P<0.05）。结合暴露水平和尿液排泄率推算暂定每日摄入量PDI（probable daily intake）,并与每日耐受摄入量TDI（Tolerable daily intake）或者毒性学关注阈值TTC（Threshold of toxicological concern）比较进行暴露风险评估。人群中OTA的平均PDI为63.1 ng/kg.bw/day,其中83%超过了TDI。AOH的平均PDI为3.2 ng/kg.bw/day,其中25%超过了TTC。AME的PDI在0.1-6.3ng/kg.bw/day之间,其中12%超过了TTC。FB1、TeA和TEN的PDI均未超过TDI/TTC。因此,OTA、AOH以及AME的暴露应该引起高度重视。同时OTA、FB1和AOH的PDI与性别差异存在统计学意义（P<0.05）。真菌毒素共暴露现象显著,最多达到6种真菌毒素,需要特别关注,并值得进一步深入研究。综上所述,本研究建立了尿液样品中18种真菌毒素生物标志物（OTA、OTB、OT-alpha、FB1、FB2、FB3、HFB1、HFB2、TeA、AOH、ALT、AME、TEN、ENNA、ENNA1、ENNB、ENNB1和BEA）的检测分析方法,满足实际样品测定和人群内暴露评估的需求。北京地区尿液样品检测分析结果表明OTA、AOH和AME的暴露水平较高且PDI超过TDI/TTC,应该引起高度重视和进一步调查研究。AOH、AME、OT-alpha和ENNB存在葡萄糖醛酸结合态代谢产物。OTA、OT-alpha、TeA、AOH、AME、TEN和ENNB的游离态与总的暴露水平呈正相关,与性别差异没有显著性关联。同时TeA与TEN、OTA与AME、OT-alpha与TEN、AOH与ENNB的总真菌毒素含量之间也存在相关性。OTA、FB1和AOH的PDI与性别差异存在统计学意义。因此完善并补充了全国以及全球关于相关真菌毒素的暴露数据以进行全面的暴露评估。