视网膜退行性病变是指视网膜细胞的不可逆性损伤。Müller胶质细胞（Müller glia cell,MGC）是视网膜中最主要的胶质细胞,对视网膜内其他细胞成分起着支持保护的作用,已有证据表明,在一些退行性病变的视网膜中可以发现功能失常的Müller胶质细胞。自噬在细胞内分解生物大分子的分子机制且被发现参与了视网膜退行性病变的发病过程。但是目前对于自噬是否且如何影响Müller胶质细胞功能尚不清楚。目的:明确自噬在正常培养以及氧化应激下对Müller胶质细胞线粒体形态,活性氧的产生,线粒体膜电位以及凋亡的影响,并探究去沉默信息调节蛋白4（Silent information regulator protein 4,SIRT4）影响Müller胶质细胞自噬功能的相关分子机制。为日后治疗青光眼等视网膜退行性病变提供潜在的分子靶点。方法:本研究首先以鼠来源Müller胶质细胞（r-MC）为对象,设置6个组别对r-MC进行分组培养:正常对照组,雷帕霉素（rapamycin,RAPA）处理组,3-甲基腺嘌呤（3-Methyladenine,3-MA）处理组,氧化应激组,氧化应激加雷帕霉素处理组,氧化应激加3-MA组。通过免疫蛋白印记定量检测cleaved-caspase3的表达和活死细胞染色来评估细胞凋亡情况。通过转染线粒体特异性定位质粒（Mito-Ds Red）检测线粒体形态变化,通过免疫蛋白印记定量检测视力萎缩基因1（Optic atrophy gene1,OPA1）,动力相关蛋白1（Dynamin-related protein1,DRP1）的表达变化,评估线粒体分离融合的情况。活性氧（Reactive oxygen species,ROS）试剂盒检测ROS产生变化,流式检测线粒体膜电位（Mitochondrial membrane potential,MMP）变化。通过转染SIRT4 RNAi（Ribonucleic acid interference）病毒,在r-MC中敲低SIRT4的表达,建立稳定SIRT4低表达细胞系。通过免疫蛋白印记定量检测微管相关蛋白1轻链3B（Microtubule-associated protein 1 light chain-3B,LC3）,P62,哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（Mammalian target of rapamycin,m TOR）,腺苷5’-单磷酸活化蛋白激酶（Adenosine 5’-monophosphate-activated protein kinase,AMPK）蛋白表达和磷酸化水平的变化,探究自噬功能以及AMPK及下游信号通路的激活情况。三磷酸腺苷（Adenosine triphosphate,ATP）试剂盒检测r-MC正常对照组,SIRT4表达敲低组的ATP产生情况。最后应用药物Compound C分别处理r-MC正常对照组与SIRT4敲低组,抑制p-AMPK磷酸化,探究自噬相关蛋白的表达情况。结果:正常培养条件下,3-MA诱导的自噬功能下调不会引起r-MC的形态学改变以及明显凋亡。氧化应激条件下,与单纯氧化应激组相比,3-MA处理后可引起r-MC细胞肥大,形成聚集团块,且凋亡增加。在氧化应激条件下,3-MA诱导的自噬下调可以降低氧化应激下OPA1的表达水平,而雷帕霉素诱导的自噬上调可以减少DRP1的表达水平。同样,在氧化应激情况下,与单纯氧化应激组相比,3-MA介导的自噬下调还可以引起ROS的产生增加和MMP去极化增加。免疫蛋白印记定量检测结果显示,与r-MC正常对照组相比,r-MC细胞的SIRT4基因表达敲低后,AMPK的磷酸化水平增加,m TOR的磷酸化水平下降,LC3 I/II比值升高,P62表达水平下降,ATP的产生减少。最后分别在r-MC正常对照组与SIRT4敲低组中加入AMPK磷酸化抑制剂Compound C处理后发现,与SIRT4敲低组相比,Compound C可逆转SIRT4敲低引起的LC3 I/II比值上调和P62的表达减少。结论:r-MC对于自噬功能紊乱引起的损伤反应性与氧压有关。正常培养条件下,自噬功能紊乱不会对r-MC线粒体功能与凋亡造成影响。但是氧化应激条件下,自噬功能的下调可以引起r-MC的胶质增生并呈团块状聚集,线粒体融合减少,呈点状结构,ROS产生增加,MMP明显去极化并加剧r-MC的凋亡。最后,我们的结果表明在r-MC中SIRT4敲低可以通过减少ATP的生成,抑制AMPK-m TOR信号通路,激活r-MC的自噬功能。