基于质谱流式技术的小鼠心肌梗死免疫调控网络研究

来源 :浙江大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lyun888
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
研究背景和目的:心血管疾病是危害人类健康的难治性疾病之一,而心肌梗死是其最常见的病因。虽然药物和手术治疗在一定程度上降低了心肌梗死早期死亡率,但由于坏死的心肌难以修复,部分病人最终会发展为心衰。急性心肌梗死早期引发强烈的炎症反应,影响组织修复和心脏重塑进程。免疫细胞在心脏中的活动是复杂多变的,在适当的条件下他们可以促进组织修复,但炎症反应过强则会导致进一步的组织损伤。而间充质干细胞(MSC)可以通过调节心梗过程中免疫细胞的活动以及数量分布以改善心梗的预后。质谱流式细胞技术(Mass Cytometry)是利用质谱原理对单细胞进行多参数检测的流式技术,它继承了传统流式细胞仪的高速分析的特点,又具有质谱检测的高分辨能力,可以同时检测上百个不同的参数,通道之间无干扰,背景也很低,是流式细胞技术一个新的发展方向,有助于我们对心梗后免疫细胞进行精细分群。本研究的目的是通过质谱流式细胞技术系统地描绘心梗后急性期心脏中免疫细胞的动态变化以及探索间充质干细胞对心梗免疫微环境的调节作用,并筛选出对心梗预后有重要影响的细胞亚群。研究方法和结果:将小鼠随机分成正常对照组,心梗后DMEM处理组和MSC处理组,采用结扎冠脉左前降支法建立急性心肌梗死小鼠的动物模型,心梗小鼠分别给予DMEM和MSC心肌内注射处理,取正常对照组心脏、心梗后1天和3天的梗死区、周边区和外周血样本,分别制备成单细胞悬液,通过质谱流式细胞技术及多种数据分析方法,绘制出心梗及MSC治疗后小鼠心脏组织和外周血免疫细胞图谱。我们运用42个细胞表面标记物对免疫细胞进行精细分群,得到18个亚群,并评价它们在心梗前后及MSC治疗前后的动态变化,同时筛选出BST2+巨噬细胞亚群。通过质谱流式的分析以及流式检测和免疫荧光染色证实BST2+巨噬细胞在MSC治疗后数量和百分比均显著提高。同时我们还通过拟时分析推测该亚群可能是外周单核细胞进入心脏后受到心梗局部微环境的影响所分化出的巨噬细胞亚群。接下来我们将该亚群通过流式分选出来与乳小鼠心肌细胞做共培养,发现它可减少心肌细胞调亡,因此可能起到心肌保护的作用。结论:心梗后心脏中免疫细胞亚群发生剧烈变化,MSC治疗后也改变了部分亚群的组织内分布。BST2+巨噬细胞可减少心肌细胞死亡,因此可能是促进心梗修复的重要靶点。
其他文献
胆道损伤通常是肝胆外科手术时意外造成的医源性胆道损伤,处理难度大,预后不佳。植入人工管状胆道支架,特别是组织工程胆道支架,用以支持和替代受损的原生胆管,是临床治疗胆道损伤的重要选项之一。在本研究中,我们筛选具有理想的机械性能和生物相容性的材料,制备一种用于胆道再生的新型双层载诱导骨髓来源间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,bMSC)的
学位
第一部分聚电解质钙复合体诱导I型胶原纤维内矿化体系构建目的构建聚电解质钙复合体诱导I型胶原纤维内快速矿化(PCCP)体系,筛选出最佳矿化条件,验证PCCP途径诱导胶原纤维内矿化。材料与方法:(1)超高浓度聚电解质钙悬浊液和磷液的配制与表征:配制聚电解质钙悬浊液和磷液:将20 g Ca Cl2·H2O溶解在10 g/L PAsp溶液中,稀释并调节溶液p H至9.5±0.2,配制最终浓度约为4 g/L
学位
研究背景:肝移植(liver transplantation,LT)是终末期肝病的最有效的治疗手段之一。随着我国公民逝世后器官捐献例数的增加,接受器官移植的受者人群的扩大以及移植受者生存率的提高,移植后慢性疾病越来越受到移植界的关注,例如移植后高脂血症(post-transplantation hyperlipidemia,PTHL)等。缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusion i
学位
研究背景通过物理、化学及生物因素制备的组织工程材料为骨组织工程修复提供了一种异体的修复方案。而物理界面形貌相较于化学生物因素而言具有更好的刺激持续性,其刺激的强度可以通过界面的尺寸和形状等进行调控,已经被广泛应用于骨科,口腔科等行业。然而大多数生物材料植入体内后无法高效操控材料发生改变,便失去了对细胞增殖及分化等行为的掌控,更加之骨修复是一个漫长的过程,不同的阶段需要细胞发挥不同的功效以获得最大骨
学位
期刊
第一部分 促生长激素释放激素激动剂改善老年小鼠心脏和全身功能的研究研究目的:本实验拟研究促生长激素释放激素激动剂(Agoni st of growth hormone-releasing hormone,GHRH-A,即MR409)对老年小鼠心脏和全身抗衰老的作用及其潜在的机制。研究方法和结果:从15月龄开始,每天给予老年小鼠皮下注射MR409(10ug/小鼠/天,n=8)或溶剂对照(n=7),共
学位
铁离子参与肺炎克雷伯菌DNA复制、蛋白质的合成和能量的传递,对于肺炎克雷伯菌的生长和繁殖至关重要。然而,铁离子在宿主体内的溶解性极低,且大部分铁离子与蛋白相结合。例如,宿主体内大部分的铁都位于红细胞内的血红蛋白中,由血红素携带;而在血浆中的铁则与转铁蛋白结合;其他细胞内的铁则储存在铁蛋白中。可见,宿主体内可供肺炎克雷伯菌利用的铁含量极少。因此肺炎克雷伯菌进化出了多种铁摄取系统(包括铁载体、血红素摄
学位
手术切除是肝细胞性肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)常见的治疗方法,当余肝体积太小时可能发生肝切后肝衰竭(post-hepatectomy liver failure,PHLF),而门静脉结扎联合肝实质分隔的二步肝切除术(associating liver partition and portal vein ligation for staged hepatectom
学位
期刊
期刊