提高重组酵母质粒稳定性和蛋白质产率的培养策略研究

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本文以产α—淀粉酶的基因工程酵母菌S.cerevisiae 20B-12(pNA3)为模型体系,在摇瓶培养条件下对外源基因的表达和发酵进行了初步研究,并在2L发酵罐中对发酵工程条件影响质粒稳定性进行了深入的研究,然后对重组酵母发酵动力学进行了数学模拟。 通过继代摇瓶实验发现,在选择性压力下,重组酵母的质粒稳定性在整个培养过程中保持90%以上。当解除选择性压力后,重组酵母的质粒很快出现缺失,但刚开始比率很低,随后质粒的缺失速度加快。重组酵母培养130小时后,质粒几乎100%
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