在家禽养殖业中,禽大肠杆菌病是一类高致死率的疾病,在饲养管理不规范、养殖环境差的情况下发病率较高,其主要发病症状为:气囊炎、包心炎、输卵管炎等,给家禽养殖造成了较大的经济损失,制约着养禽业的健康发展,而禽致病性大肠杆菌（Avain pathogenic coli,APEC）是禽大肠杆菌病主要的致病原因。禽β-防御素（Avian beta defensins,AvBDs）是一种半胱氨酸含量较多的小分子肽,蛋白分子量通常在3-6 kD左右,在鸡的先天性免疫系统中具有重要的作用。由于其特殊的抗菌机制、在动物体内不会产生残留,且具有广谱抗菌性,有望成为抗生素替代品。然而,由于防御素在体内表达量低,且分离成本较高,所以通过体外构建表达系统以获得大量防御素,相关研究分述如下:1.三种禽β防御素载体构建及蛋白表达和纯化根据Genbank获得三种禽β-防御素成熟肽基因序列,根据大肠杆菌密码子偏好性进行优化,将其亚克隆至pET-32a表达载体,并转化至BL21（DE3）pLysS感受态细胞中,利用SDS-PAGE分析蛋白表达情况,利用镍柱进行目的蛋白的纯化,并用Western-blot 验证。经 Western-blot 验证,AvBD2、AvBD6 和 AvBD9 在在 25 kD 左右有特异性条带,证明了三种融合蛋白在BL21（DE3）pLysS工程菌中进行了表达。利用BCA蛋白浓度测定试剂盒测得三种融合蛋白纯化后的浓度为0.491 mg/mL、1.14 mg/mL、1.025 mg/mL。2.三种禽β防御素体外抑菌活性研究选取无菌96孔板,每种防御素设置2个重复,每隔2 h测量一次OD600吸光度值,AvBD2的微量抑菌试验结果显示:加入AvBD2后对禽致病性大肠杆菌AE17的生长具有抑制性,随着浓度的降低,抑制效果也降低,最小抑菌浓度为150 mg/L;AvBD6的微量抑菌试验结果显示:加入AvBD6,在10 h之前各蛋白浓度对AE17的生长具有较明显的抑制性,最小抑菌浓度为150 mg/L;AvBD9的微量抑菌试验结果显示:整体效果和AvBD6相似,10 h前对AE17生长具有较为明显的抑制效果,最小抑菌浓度 300mg/L。3.三种禽β防御素对雏鸡感染APEC治疗试验将56只14日龄雏鸡随机分成8组,分别为AvBD2、AvBD6和AvBD9对照组、AvBD2、AvBD6和AvBD9治疗组、空白对照组和攻毒组,每组各7只。空白对照组:每只雏鸡肌肉注射1 mL灭菌PBS;攻毒组:每只鸡按照AE17最小致死浓度肌肉注射1 mL菌液;治疗组:每只鸡按照AE17最小致死浓度肌肉注射1 mL菌液,待雏鸡出现临床症状时（约6h后）注射重组AvBD2、AvBD6和AvBD9 1 mL（浓度为300μg/mL）实施治疗。在相同饲养条件下观察7 d,空白对照组未出现雏鸡死亡;攻毒组死亡率为100%;AvBD2治疗组死亡率为14%;AvBD6治疗组死亡率为0%;AvBD9治疗组死亡率为28%。结果说明重组AvBD2、AvBD6和AvBD9能较好的抵抗AE17株感染,降低雏鸡死亡率。