人C反应蛋白（C-reactive protein,CRP）是一种典型的急性期蛋白,其循环水平可在感染或组织损伤后数小时内迅速升高至健康水平的数百倍。长久以来,人们在关于其急性期表达调控的研究中坚持一种观点——CRP急性期表达调控仅依赖于CRP基因启动子近端157bp区域。我们通过不同版本的荧光素酶报告基因载体实验证明了这只是早期报告基因载体含有潜在转录因子结合位点导致的假象。在改良版本的报告基因载体中,157bp启动子甚至更长的启动子并没有表现急性期反应,这预示CRP急性期表达依赖于尚未明确定义的远端调节元件。存在显著性急性期反应差异的人、小鼠和大鼠157bp启动子存在高度保守也印证了这一现象。随后,通过3C技术获得了Hep3B细胞中与CRP启动子高频互作的12个远端序列,并通过报告基因检测其活性,有4个远端序列对于报告基因活性有显著影响。为进一步确认这4个远端序列的功能,我们获取并分析了ENDOCE数据库中表观遗传修饰的数据,发现仅远端元件P1具有高H3K4me1/H3K27ac修饰,且在DNase敏感性分析中,IL-6和IL-1β可使P1处的DNase敏感性显著增强,这些结果表明位于CRP上游的远端元件P1具有增强子活性。随后使用特异性位点CRISPR激活（CRISPRa）和CRISPR干扰（CRISPRi）原位验证了P1增强子在CRP急性期表达中的作用。通过重叠片段分割确认P1增强子发挥作用的核心区域,并通过Crispr/Cas9介导的P1原位缺失检验其作用,最终验证了P1增强子核心序列在CRP急性期表达中具有重要作用。染色质免疫共沉淀技术证明了CEBPβ和STAT3在P1增强子处的结合在响应刺激时显着增加;与前人研究结果一致,CRP启动子在响应刺激时CEBPβ和STAT3结合也显著增加,有趣的是,我们发现一种转录因子USF2在P1增强子中在刺激后结合显著增强,而在启动子中并没有表现出这一特征。各哺乳动物中的序列比对表明P1增强子表现出高保守性,这与CRP在哺乳动物中普遍表现急性期相一致。而我们在对人与鼠增强子活性的探究中发现,P1增强子的活性在鼠中并没有被活化,这可能解释了鼠中较弱的急性期反应,而该现象进而被报告基因所验证。此外,物种间的表达模式差异,不仅取决于其DNA原始序列的变异,还与其染色质三维构象有很大的关系。我们通过人和鼠细胞中的3C和生物素捕获质谱实验,初步验证了CRP和SAP两个蛋白的急性期表达存在着竞争关系,它们互相竞争有关急性期表达的顺式作用元件和反式作用因子,在不同的物种中,其获得竞争优势的基因也不同,因此表现出急性期表达差异。总的来说,P1增强子是CRP急性期表达的关键位点,并决定了物种间的急性期反应差异。