伤寒沙门氏菌致病仔猪胃肠道组织中蛋白酶激活受体2的定位研究

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背景与目的:断奶仔猪腹泻是仔猪在断奶期间由多种因素引起的腹泻病的总称,对仔猪的生长发育、抗病力、饲料转化率等带来很大的影响。蛋白酶激活受体2属于G蛋白偶联受体家族,机体内分布广泛,它的激活能够引起不同的细胞分泌各种炎症介质和细胞因子,参与多种生理或病理生理作用。本试验通过H.E.染色观察腹泻仔猪胃肠道病理变化,和免疫组织化学染色观察断奶后PAR-2在正常与腹泻仔猪体内的分布及量的变化规律,研究PAR-2与断奶仔猪腹泻之间的关系。方法:取断奶仔猪的胃肠道,按照组织学特性分别分组为:胃贲门区、胃底区、胃幽门区,十二指肠、空肠、回肠、结肠、盲肠段。进行多聚甲醛固定,常规包埋,4μm切片。同时,无菌取肠道内容物作微生物学病原菌的分离鉴定。健康仔猪组织作对照,运用免疫组织化学原理,各组织石蜡切片用山羊抗人PAR-2多克隆抗体作一抗,进行SABC法染色,观察组织内PAR-2定位部位,并同步进行H.E.染色,镜检拍照比较分析。结果表明:1.腹泻仔猪部分组织有干酪样病变,全身浆膜有不同程度的出血点,胃肠道内容物稀薄,粘膜表面覆着大量粘液,肠壁厚薄不均,弹力下降;培养分离鉴定致病菌为伤寒沙门氏菌;2.HE染色观察,病理组织学变化主要表现为粘膜上皮细胞脱落变性,肠壁平滑肌变薄,固有层内中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞等浸润、水肿,粘膜下层淋巴小结增生,分别表现出不同的炎症程度。3.运用免疫组织化学分析,发现仔猪胃肠道广泛的表达PAR-2,特别在粘膜上皮细胞的顶端,腺细胞的基底部,血管上皮细胞、成纤维细胞、中性粒细胞、嗜酸性粒细胞等,所设对照组均未见阳性反应;并且,PAR-2在腹泻仔猪比正常仔猪的表达增加,特别是炎性细胞的强表达。综上所述,PAR-2在胃肠道广泛存在,小肠表达量略低;同时发病初期炎症细胞强表达,提示PAR-2在健康和疾病中起双重作用,表明PAR-2激动剂和拮抗剂,在应用到各种疾病的治疗中会有很大帮助。
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