免疫疗法已经彻底改变了癌症治疗,成为肿瘤治疗最热门的领域之一。近年来,旨在治疗现有肿瘤或预防肿瘤复发的治疗性肿瘤疫苗作为诱导有效免疫反应的一种直接方法,已被广泛应用于肿瘤免疫治疗领域。而成功的肿瘤疫苗需要肿瘤抗原和适当的佐剂来刺激DCs成熟才能实现最佳的T细胞活化效果。光热治疗（PTT）、光动治疗（PDT）等传统疗法在直接杀死肿瘤细胞的同时还可以诱导肿瘤细胞发生免疫原性细胞死亡（ICD）,其特征是从垂死的肿瘤细胞中释放损伤相关分子模式以及肿瘤相关抗原（TAAs）。这种可在肿瘤部位局部释放TAAs以激活自身DCs的原位疫苗接种策略受到了越来越多的关注。IR780作为一种光敏剂,同时具有光热转换效率以及光动性能,且能够优先聚集在肿瘤细胞内部。因此,IR780可被应用于原位疫苗策略。Toll样受体（TLR）激动剂可促进DCs成熟,是广泛应用的一类免疫佐剂。其中,咪唑喹啉类药物（IMDQ）是TLR7/8的有效小分子激动剂,可诱导激活MyD88依赖的经典TLR信号通路,从而触发免疫反应。因此,本文设计了一种原位疫苗策略,该策略将PTT/PDT诱导的ICD和TAAs释放与TLR7/8激动剂触发的先天性免疫激活相结合,以促进肿瘤特异性免疫反应。使用具有生物可降解性的多肽聚合物——聚天冬氨酸（PASP）作为载体材料,通过酰胺缩合分别连接IMDQ和IR780,可有效防止药物的泄漏。其中,IR780本身具有一定的肿瘤细胞靶向性。为了使IMDQ能够特异性靶向DCs,本课题在PASP-IMDQ（pIM）上连接了甘露糖衍生物,以特异性靶向DCs表面的甘露糖受体。利用PASP中存在的大量羧基,用氯化钙（CaCl2）作为交联剂可将其交联形成具有pH响应特性的纳米复合物（NanopIR/mpIM）。瘤内注射后,NanopIR/mpIM在微酸的肿瘤微环境中逐渐解离,其中,PASP-IR780（pIR）在808 nm近红外激光照射下可发挥光热治疗和光动力治疗作用,直接杀死肿瘤细胞,且引发ICD并释放TAAs;PASP-IMDQ-Man（mpIM）促进DCs的成熟,进而刺激初始T细胞的增殖和分化,从而产生良好的抗肿瘤免疫治疗效果。本文主要研究内容和结果如下:1.IR780及IMDQ含量测定方法的建立采用紫外可见分光光度法（UV-Vis）成功建立了 IR780和IMDQ的含量测定方法,方法学检测结果均符合要求。2.共载IR780和IMDQ纳米复合物的制备及表征成功合成了 IR780-NH2、pIR、mpIM。制备的NanopIR/mpIM具有规整的球形形貌以及pH敏感特性,可在pH6.5环境下解离,且光热、光动性能良好。3.NanopIR纳米复合物的体外抗肿瘤效果评价选用CT26结直肠癌细胞评价了 NanopIR的体外抗肿瘤效果。证明NanopIR可以更好地被肿瘤细胞内化,具有生物相容性以及光治疗杀伤肿瘤细胞的性能,且激光照射后可以引起ICD,为联合免疫佐剂以激活抗肿瘤免疫反应提供了基础。4.mpIM在体内外靶向和激活DCs能力的评价通过流式细胞仪以及ELISA试剂盒对DCs摄取以及DCs的成熟情况进行表征,在体外和体内水平均证明甘露糖衍生物修饰后提高了 mpIM对DCs的靶向性并促进了 DCs的成熟。5.NanoPIR/mpIM纳米复合物的体内抗肿瘤效果评价建立双侧肿瘤模型以评价NanoPIR/mpIM的体内抗肿瘤效果,证明NanopIR/mpIM具有良好的肿瘤蓄积能力和更高的稳定性,可明显抑制小鼠原发肿瘤以及远端肿瘤的生长,且体内初步安全性良好。6.NanoPIR/mpIM纳米复合物的体内抗肿瘤机制的研究NanoPIR/mpIM治疗后能够有效地促进DCs的成熟和肿瘤相关巨噬细胞的复极化,进而有效激活T细胞免疫应答,且明显提升了效应记忆T细胞所占的比例,对机体具有长期保护作用。