【摘 要】
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喜树(Camptotheca acuminata Decne)是我国特有树种。喜树中含有的吲哚类生物碱是治疗多种癌症的药物,它的合成过程涉及到很多酶的参与,其中的一个关键酶次番木鳖苷合成酶(Se
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喜树(Camptotheca acuminata Decne)是我国特有树种。喜树中含有的吲哚类生物碱是治疗多种癌症的药物,它的合成过程涉及到很多酶的参与,其中的一个关键酶次番木鳖苷合成酶(Secologanin synthase, SLS),编码这个酶的基因是SLS基因,我们的实验小组已经克隆了一个与SLS基因功能相似的基因(sls-like),本实验把sls-like基因的开放阅读框插入到重组质粒中,并在大肠杆菌DH5α中表达。经过PCR、电泳以及测序实验,验证sls-like基因正确地插入到质粒中(重组之后的质粒在此称为pBI190-1575)。然后把pBI190-1575转移到载体农杆菌中,接着利用农杆菌把sls-like基因转移到模式植物——烟草中,在选择性培养基上诱导烟草叶片生芽、生根,获得完整植株。以推定的转基因叶片作为外植体或验证材料,经过芽再生实验、PCR验证sls-like基因,以及比较了在大肠杆菌中质粒之间(pBI121、pBI190-1575)、转基因烟草和非转基因烟草之间的蛋白质条带,结果表明：sls-like基因已经在原核生物(大肠杆菌)和真核生物(烟草)中成功表达。
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