【摘 要】
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目的:骨缺损是医学中较常见的问题,颌骨缺损以及牙周骨组织的缺损不仅会影响患者生理健康,还会带来极大的心理创伤。常见的治疗方法为骨移植或使用组织工程材料,骨移植价格高、创伤大、容易发生免疫排斥反应导致移植失败,组织工程骨微创、安全,同时可以根据需要较精确的制成所需要的三维形状,这些特性使其成为修复骨缺损的重要手段。目前组织工程材料植入后的营养供应问题是影响其大面积应用于临床的主要问题,材料植入后需要
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目的:骨缺损是医学中较常见的问题,颌骨缺损以及牙周骨组织的缺损不仅会影响患者生理健康,还会带来极大的心理创伤。常见的治疗方法为骨移植或使用组织工程材料,骨移植价格高、创伤大、容易发生免疫排斥反应导致移植失败,组织工程骨微创、安全,同时可以根据需要较精确的制成所需要的三维形状,这些特性使其成为修复骨缺损的重要手段。目前组织工程材料植入后的营养供应问题是影响其大面积应用于临床的主要问题,材料植入后需要快速的实现材料内的血管再生,利用新生的血管建立微循环,提供创伤愈合所需要的养分和氧气,所以实现组织工程材料的快速血管化将大大提高治疗成功几率减小患者痛苦。外源性稳恒直流电场（Direct Current Electric Field;DCEF）可模拟创伤愈合中的内源性电场,影响并调控参与愈合过程的各种细胞和细胞因子。实验以鸡胚绒毛尿囊膜上的血管为模型,加载不同强度电场,测量血管生长相关参数,研究电场对其的作用,以期得到促进组织工程骨预血管化的方法,增加缺损修复成功率。方法:在37.5℃,70%湿度的条件下培育罗曼鸡胚,使用孵化至第八天的鸡胚建立实验模型,通过48小时的恒温恒湿箱培养,观察模型的存活率及鸡胚生存情况。使用COMSOL Multi-physics 5.0模拟加电环境下实验模型内的电场分布情况。将模型分为A、B、C、D、E五个组,A-C组每组包含六枚成功加电的样本,D、E组每组包含六枚样本,分别加载不同大小及方向的稳恒直流电场,A组（对照组）电压为0V,B组为-0.75V,C组为-1.5V,D组为-3V,E组为+1.5V,在加电0小时、12小时、24小时、36小时和48小时拍摄相关图片,使用Adobe Photoshop CS6处理图片,使用Image J测量相关血管数据,SPSS22.0分析结果。根据实验中观察到的最佳电压-1.5V,对鸡胚进行每两小时一次的连续拍照直至12小时,观察电场对血管影响的变化。结果:使用鸡胚建立的实验模型在37.5℃,70%湿度的培养条件下存活率为83.3%。加载不同大小电场以后,A组平均血管长度增长速率为0.012mm/h,B组为0.023mm/h,C组为0.0475mm/h。使用独立样本T检验对加载-1.5V电压后的CAM血管与对照组相比较,加电48H后血管平均长度为（4.22+0.436）mm/mm~2,对照组为（3.21+0.31）mm/mm~2,两者有显著差异（P＜0.01）。48小时后,C组血管角度为（21.36°+20.16°）,对照组则为（82.17°+50.44°）,差异具备统计学意义（P＜0.05）。D、E两组电极周围的鸡胚绒毛尿囊膜发生变性,鸡胚死亡。在-1.5V条件下,CAM血管生长趋势为先减少后增加。结论:利用鸡胚建立的模型制作过程简单,成本较低,存活率高,能大量重复,并且可清晰的观察到血管的变化,是较好的用于血管研究实验的动物模型。同时实验发现适宜大小范围内的负电可促进血管生长,增加血管生长速率,改变血管角度向负极生长,证明DCEF对血管有明显影响,在实现组织工程材料的快速血管化中可能有重要作用。
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