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目的:为了研究miRNA-155在肝星状细胞系HSC-T6中的生物学行为,同时研究miRNA-155对Wnt/β-catenin通路的影响,MMP-9在非酒精性脂肪性肝病发展与进展中的作用以及miRNA-155是否与MMP-9相关。方法:1、本研究选用大鼠肝星状细胞系HSC-T6作为实验对象,构建NAFLD模型,涉及HSC-T6的培养,细胞传代,冷冻保存和复苏等操作。2、利用荧光定量PCR技术研究HSC-T6中mi R-155、Wnt/β-catenin通路中β-catenin-m RNA、Dsh-m RNA、APC-m RNA、GSK3β-m RNA及MMP-9-m RNA的表达情况;3、利用Western Blot技术研究HSC-T6中Wnt/β-catenin通路相关蛋白β-catenin、Dsh、APC、GSK3β及MMP9的表达情况;4、采用miRNA-155抑制剂（mi R-155 inhibitor）、miRNA-155类似物（mi R-155 mimic）及Wnt/β-catenin通路抑制剂（Wnt-C59）处理HSC-T6细胞株,利用荧光定量PCR技术和Western Blot技术研究HSC-T6中mi R-155、Wnt/β-catenin通路相关蛋白β-catenin、Dsh、APC、GSK3β及MMP-9的表达情况,分别从基因水平和蛋白水平上说明miRNA-155与MMP-9之间的相互关系及miRNA-155在Wnt/β-catenin通路中的生物学行为。具体实验分组如下A组:mi R-155 mimic,Wnt-C59（+）;B组:mi R-155 mimic,Wnt-C59（-）;C组:mi R-155正常,Wnt-C59（+）;D组:mi R-155正常,Wnt-C59（-）;E组:mi R-155 inhibitor,Wnt-C59（+）;F组:mi R-155 inhibitor,Wnt-C59（-）。5、采用统计软件SPSS20.0用于统计描述与推断,每次实验至少进行3次重复独立实验,计量资料以平均值±标准差（Mean±SD）表示,组间比较采用单因素方差分析（one-way analysis of variance,ANOVA）,组间两两比较采用LSD法（least significance of difference）,检验水准α=0.05.当P＜0.05时认为差异具有统计学意义。统计作图采用Graphpad Prism 5.0软件。结果:1、肝星状细胞在完全培养基（DMEM高糖培养基+10%FBS+1%双抗）,37℃,5%CO?培养箱中培养,镜下观察细胞贴壁生长好,形态正常,培养液清亮无污染。2、采用mi R-155 inhibitor、mi R-155 mimic及Wnt-C59处理HSC-T6细胞株,利用荧光定量PCR技术研究HSC-T6中mi R-155、Wnt/β-catenin通路β-catenin-m RNA、Dsh-m RNA、APC-m RNA、GSK3β-m RNA及MMP-9-m RNA的表达情况,每组设定3个复孔,至少重复三次实验,其中APC-m RNA、Dsh-m RNA、GSK3β-m RNA、β-catenin-m RNA、MMP-9-m RNA以GAPDH为内参基因,mi R-155以U6为内参基因,将测得基因的扩增倍数=2-△△CT按照平均值±标准差（Mean±SD）的结果表示,对其进行从大到小的排序,并进行统计学分析如下:（1）mi R-155:A＞B＞C＞D＞F＞E（P＜0.001）,差异具有统计学意义;（2）β-catenin-m RNA:B＞D＞F＞A＞C＞E（P＜0.001）,差异具有统计学意义;（3）Dsh-m RNA:B＞D＞F＞A＞C＞E（P＜0.001）,差异具有统计学意义;（4）APC-m RNA:E＞C＞A＞F＞D＞B（P＜0.001）,差异具有统计学意义;（5）GSK3β-m RNA:E＞C＞F＞A＞D＞B（P＜0.001）,差异具有统计学意义;（6）MMP9-m RNA:F＞E＞D＞C＞A＞B（P＜0.001）,差异具有统计学意义。3、采用mi R-155 inhibitor、mi R-155 mimic及Wnt-C59处理HSC-T6细胞株,利用Western Blot技术研究Wnt/β-catenin通路相关蛋白β-catenin、Dsh、APC、GSK3β及MMP9的表达情况,至少重复3次实验,Alpha Ease FC软件处理系统分析目标带的光密度值,以GAPDH为内参,将灰度比（相对含量比）按照平均值±标准差（Mean±SD）的结果表示,并对其进行从大到小的排序,进行统计学分析,结果如下:（1）β-catenin:B＞D＞F＞A＞C＞E（P＜0.001）,差异具有统计学意义;?Dsh:B＞D＞F＞A＞C＞E（P＜0.001）,差异具有统计学意义;（3）APC:E＞C＞A＞F＞D＞B（P＜0.001）,差异具有统计学意义;（4）GSK3β:E＞C＞F＞A＞D＞B（P＜0.001）,差异具有统计学意义;（5）MMP9:F＞E＞D＞C＞A＞B（P＜0.001）,差异具有统计学意义。结论:1、Mi RNA-155促进Wnt/β-catenin通路中β-catenin和Dsh的表达,抑制APC和GSK3β的表达,影响Wnt/β-catenin通路的激活状态,可促进肝星状细胞的活化、促进肝细胞凋亡,加快NAFLD的进展。2、Mi RNA-155的表达趋势与MMP-9基因的表达趋势相反,呈负相关性,推测miRNA-155抑制MMP-9的表达,认为MMP-9能够抑制NAFLD肝纤维化的过程。3、Mi RNA-155作用于Wnt/β-catenin通路影响靶基因MMP-9表达,进而促进非酒精性脂肪性肝病的进一步发展。