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目的:研究益气活血方(消渴通痹颗粒)在体外高糖环境下对内皮祖细胞(EPCs)增殖能力和凋亡的影响。丰富“益气一生脉”理论在血管病变中的内涵及外延,为糖尿病血管病变的中医临床用药提供理论依据。
方法:采用体重在185-210g的SPF级成年SD大鼠24只随机分为4组,分别为中药1组(Y1)、中药2组(Y2)、中药3组(Y3)及对照组(D)。按1ml/100g比例每日给予4组大鼠不同浓度剂量的消渴通痹颗粒药液及生理盐水灌胃,连续7天后,麻醉经腹主动脉采血,离心收集含药血清,制作试验分组培养液,分别为对照组(C)、高糖对照组(G)、中药1组(Z1)、中药2组(Z2)、中药3组(Z3)。向五组培养液中加入经分离、培养、鉴定后的EPCs进行培养,通过MTT比色法及细胞凋亡的检测观察各组EPCs增殖、凋亡情况。
结果:在同一视野中,与对照组(C)相比,高糖对照组(G)EPCs明显减少,可见其生长受抑制;Z1、Z2、Z3中药组单个视野内细胞密度与对照组(C)相比均升高。分别检测培养1天、2天、3天的5组细胞吸光度,显示在不同时间段与对照组(C)比较,不同中药组Z1、Z2、Z3的EPCs吸光度值(OD)均升高,高糖对照组OD值均降低,差异均有统计学意义(p<0.05)。消渴通痹颗粒含药血清在干预24h时,EPCs的OD值呈一定的剂量相关性,Z1组较Z2、Z3组的EPCsOD值明显增高(p<0.05),提示EPCs增殖效果明显。随干预时间推移,Z1组EPCs的OD值逐渐降低(p<0.05);Z2组、Z3组EPCs的OD值均逐渐增高,于48h达到高峰(p<0.05)。益气活血方消渴通痹颗粒能促进EPCs的增殖,并且其作用呈一定的量效与时效关系。采用流式细胞学方法分别检测培养24h、48h的5组EPCs凋亡情况,与对照组(C)相比高糖组(G)明显增加细胞凋亡发生(p<0.05);与高糖对照组(G)相比,不同浓度含药血清Z1、Z2、Z3组EPCs凋亡减少(p<0.05)。可见,体外高糖环境能增加EPCs凋亡,益气活血方消渴通痹颗粒在体外高糖环境下对EPCs凋亡具有抑制作用,并且其作用呈一定的量效与时效关系。
结论:
1益气活血方(消渴通痹颗粒)在体外高糖环境下对EPCs增殖能力具有促进作用。
2益气活血方(消渴通痹颗粒)在体外高糖环境下对EPCs凋亡具有抑制作用。
3在“益气一生脉”中医理论指导下,益气活血方通过对EPCs功能产生调控作用,可以改善糖尿病血管病变。
方法:采用体重在185-210g的SPF级成年SD大鼠24只随机分为4组,分别为中药1组(Y1)、中药2组(Y2)、中药3组(Y3)及对照组(D)。按1ml/100g比例每日给予4组大鼠不同浓度剂量的消渴通痹颗粒药液及生理盐水灌胃,连续7天后,麻醉经腹主动脉采血,离心收集含药血清,制作试验分组培养液,分别为对照组(C)、高糖对照组(G)、中药1组(Z1)、中药2组(Z2)、中药3组(Z3)。向五组培养液中加入经分离、培养、鉴定后的EPCs进行培养,通过MTT比色法及细胞凋亡的检测观察各组EPCs增殖、凋亡情况。
结果:在同一视野中,与对照组(C)相比,高糖对照组(G)EPCs明显减少,可见其生长受抑制;Z1、Z2、Z3中药组单个视野内细胞密度与对照组(C)相比均升高。分别检测培养1天、2天、3天的5组细胞吸光度,显示在不同时间段与对照组(C)比较,不同中药组Z1、Z2、Z3的EPCs吸光度值(OD)均升高,高糖对照组OD值均降低,差异均有统计学意义(p<0.05)。消渴通痹颗粒含药血清在干预24h时,EPCs的OD值呈一定的剂量相关性,Z1组较Z2、Z3组的EPCsOD值明显增高(p<0.05),提示EPCs增殖效果明显。随干预时间推移,Z1组EPCs的OD值逐渐降低(p<0.05);Z2组、Z3组EPCs的OD值均逐渐增高,于48h达到高峰(p<0.05)。益气活血方消渴通痹颗粒能促进EPCs的增殖,并且其作用呈一定的量效与时效关系。采用流式细胞学方法分别检测培养24h、48h的5组EPCs凋亡情况,与对照组(C)相比高糖组(G)明显增加细胞凋亡发生(p<0.05);与高糖对照组(G)相比,不同浓度含药血清Z1、Z2、Z3组EPCs凋亡减少(p<0.05)。可见,体外高糖环境能增加EPCs凋亡,益气活血方消渴通痹颗粒在体外高糖环境下对EPCs凋亡具有抑制作用,并且其作用呈一定的量效与时效关系。
结论:
1益气活血方(消渴通痹颗粒)在体外高糖环境下对EPCs增殖能力具有促进作用。
2益气活血方(消渴通痹颗粒)在体外高糖环境下对EPCs凋亡具有抑制作用。
3在“益气一生脉”中医理论指导下,益气活血方通过对EPCs功能产生调控作用,可以改善糖尿病血管病变。