论文部分内容阅读
乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤,对全球及我国女性的身心健康带来了巨大威胁。据最新统计资料显示,乳腺癌已成为世界范围内女性最常见的恶性肿瘤,占所有女性新发癌症的31%。中国正处于癌症转型期,乳腺癌的负担也越来越重,根据国家癌症中心于2022年2月发布的全国癌症统计数据显示,2016年全国女性新发乳腺癌病例约为30.6万,因乳腺癌死亡的人数高达7.2万人。有多种因素可以增加患乳腺癌的风险,其中包括乳腺癌家族史、吸烟、饮食习惯、肥胖和糖尿病等。基于既往的回顾性研究发现,肥胖与女性患乳腺癌的高风险相关,特别是绝经后女性。肥胖可以通过诱导脂肪细胞功能障碍,改变脂肪因子和激素的表达水平,促进肥胖相关肿瘤的进展。既往研究显示,肥胖患者体内瘦素(Leptin,LEP)的高表达与乳腺癌的发生显著相关。LEP是肥胖基因的循环产物,是一种主要由脂肪细胞表达和分泌的16kDa糖蛋白,主要通过结合和激活瘦素受体(Leptin receptor,LEPR)以及瘦素受体重叠转录本(Leptin receptor overlapping transcript,LEPROT)来发挥其生物学作用。除了调节体重外,LEP还被发现参与了许多重要的生物过程,如胰岛素抵抗、细胞增殖、凋亡、血管生成、癌细胞的炎性反应、氧化应激和抗肿瘤免疫调节等。既往研究表明,在良性和恶性的乳腺上皮细胞中,LEP和LEPR都能够促进细胞增殖和血管生成。血浆中LEP水平过高与乳腺癌发生风险增加显著相关,被认为是关联肥胖与乳腺癌的潜在危险因子,但在以往研究中LEP及LEPR 基因的单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphisms,SNPs)与乳腺癌发病风险的相关性研究结果并不一致。研究目的本研究旨在探讨LEP及其受体LEPR基因的SNPs与中国女性乳腺癌发生风险的相关性。研究方法本研究共纳入963名乳腺癌患者和953名健康女性分别作为病例组和对照组。采用 Sequenom MassARRAY? SNP 检测方法对 LEP rs 10244329、LEP rs10954173、LEP rs2167270、LEP rs3828942、LEP rs4731426、LEPR rs1137101及LEPR rs4655555位点进行分型检测。利用非条件logistics回归分析所选SNPs与中国女性乳腺癌发生风险的相关性。进一步根据体重指数(Body mass index,BMI)、腰臀比(Waist-hip ratio,WHR)、雌激素受体(Estrogen receptor,ER)和孕激素受体(Progesterone receptor,PR)状态进行分层分析。采用SHEsisPlus软件分别进行LEP和LEPR基因SNPs位点间的连锁不平衡分析,获得各基因SNPs位点的单体型,并分析各单体型与乳腺癌发生风险的相关性。利用eQTLGen数据库进行表达数量性状位点(Expression quantitative trait loci,eQTL)分析,利用 The Cancer Genome Atlas(TCGA,https://portal.gdc.cancer.gov/)数据库明确风险位点相关基因的表达与乳腺癌患者预后的关系。研究结果1.病例组与对照组两组间月经状态(P=0.012)及乳腺癌家族史(P=0.020)存在的差异有统计学意义,两组间其他因素均无统计学差异,提示在后续的乳腺癌易感性分析中应采用多因素回归模型调整上述2个潜在的混杂因素。2.通过χ2拟合检验对各SNPs位点的对照组基因型进行哈迪-温伯格平衡(Hardy-Weinberg Equilibrium,HWE)检验,发现均满足 HWE(P>0.05),故均可以纳入后续研究。LEPR rs1137101、LEPR rs4655555两个位点的基因型在病例组及对照组的分布差异均具有统计学意义(P<0.05),其余SNPs位点各基因型分布未见统计学差异。3.在调整了月经状态和乳腺癌家族史之后进行非条件logistics回归分析,经Bonferroni校正后发现,与携带LEPR rs1137101 GG的基因型的女性相比,GA基因型可降低28.1%的乳腺癌发生风险(OR=0.719,95%CI:0.578-0.894)。分别与携带LEPR rs4655555 AA、TA+AA基因型的女性相比,TT基因型均可降低乳腺癌发生风险(OR=0.574,95%CI:0.377-0.873;OR=0.595,95%CI:0.394-0.899)。同时,LEPR rs1137101、LEPR rs4655555 多态性也与 ER+/PR+乳腺癌发生风险有关。4.在调整了月经状态和乳腺癌家族史之后,根据BMI或WHR分层,经Bonferroni 校正后,LEPR rs1137101 和 LEPR rs4655555 多态性在 BMI ≤ 24 kg/m2、WHR≥0.85亚组中与乳腺癌风险降低有关(P<0.025)。在BMI≤24.0 kg/m2&WHR≥0.85 及 BMI>24.0 kg/m2&WHR≥0.85 亚组中,LEPR rs1137101 GA+AA基因型携带者与GG基因型相比分别降低51.8%(OR=0.482,95%CI:0.288-0.807)和 43.7%(OR=0.563,95%CI:0.344-0.921)的乳腺癌风险。5.单体型分析结果显示,LEPR“GA”(顺序为rs1137101-rs4655555)单体型可增加19.6%乳腺癌发生风险(OR=1.196,95%CI:1.030-1.388),“AT”单体型可降低 24.4%乳腺癌发生风险(OR=0.756,95%CI:0.626-0.914)。6.基于eQTLGen数据库发现了 2个与rs4655555相关的顺式eQTL(cis-eQTL)基因——LEPR和LEPROT。利用TCGA数据分析结果表明,与匹配的癌旁正常组织相比,LEPR和LEPROT在乳腺癌肿瘤组织中的表达升高(P<0.001)。基于TCGA-BRCA数据,通过Kaplan-Meier生存分析,LEPR的高表达与乳腺癌患者的不良总生存(Overall survival,OS)显著相关(HR=1.68,95%CI:1.01-2.80)。结论LEPR rs1137101和LEPR rs4655555与中国女性乳腺癌的易感性相关,是潜在的乳腺癌风险预测生物标志物。LEPR rs1137101可能具有降低中心性肥胖女性乳腺癌发生风险的潜力,为预防肥胖相关乳腺癌提供了新的思路。