转化生长因子在复合异种部分脱钙骨修复兔下颌骨缺损中表达的实验研究

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【目的】:观察不同浓度碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)复合异种部分脱钙骨(partly demineralized xenogeneic bone,PDXB)修复兔下颌骨缺损时转化生长因子-β1(transforming growth factor betal,TGF-β1)的表达情况,分析bFGF浓度与TGF-β1蛋白表达水平之间的相互关系以及在下颌骨缺损移植修复中TGF-β1与VEGF蛋白表达之间的关系,探讨TGF-β1在骨移植物中的表达,为临床应用多种生长因子修复颌骨缺损、促进骨折愈合提供理论依据。 【方法】:将54只新西兰大白兔按随机分配原则,分为5组。实验组ⅠⅡⅢ各12只,双侧下颌骨缺损区分别植入梯度浓度(1~lOOng/mm<3>)PDXB/bFGF混合充填材料;实验组Ⅳ12只,双侧下颌骨缺损区分别植入PDXB;实验组Ⅴ6只,双侧下颌骨缺损留置空白。分别于术后2w、4w、8w各处死18只动物,取材行HE染色及免疫组化染色观察TGF-β1蛋白表达情况,并对比VEGF蛋白表达的相关性,采用图像分析软件量化计算 TGF-β1蛋白表达水平并分析其相互关系。 【结果】:(1)大体及组织学观察显示单纯植入PDXB成骨方式以“爬行替代”为主,复合移植材料成骨方式兼具传导成骨和诱导成骨。(2)免疫组化染色发现:TGF-β1表达产物主要位于增殖的成骨细胞及血管内皮细胞内;定量分析显示:TGF-β1 蛋白表达水平与bFGF的复合浓度和植入时间具有密切关系:在10ng/mm<3>浓度时,TGF-β1蛋白表达水平最强;术后2w~4w,TGF-β1蛋白呈强阳性表达,而在术后4w~8w,TGF-β1蛋白表达呈现明显递减趋势。(3)相关性分析表明:TGF-β1蛋白表达水平与VEGF的表达存在明显正相关关系(相关系数r=0.965,P<0.001)。 【结论】:1.bFGF复合异种部分脱钙骨混合充填材料具有骨传导和骨诱导双重功能,是修复颌骨缺损的一种较理想的骨移植物;2.bFGF复合异种部分脱钙骨可显著地上调骨移植区TGF-β1的表达,复合bFGF浓度为10ng/mm<3>的实验组促进作用最强;3.在骨缺损移植实验中,TGF-β1的表达与VEGF的表达有明显的相关性,TGF-β1可诱导VEGF蛋白的表达。
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