卵白蛋白（OVA）是鸡蛋清中的主要蛋白,具有多种生物活性,但也具有强烈的致敏性。OVA会被机体的免疫系统识别,引发IgE介导的Ⅰ型超敏反应。固有免疫是机体对抗外来物质的第一道防线,它在机体抵抗病原体感染中发挥重要作用,但对于固有免疫在OVA致敏过程中的作用机制仍是未知的。秀丽隐杆线虫作为只有固有免疫系统的简单模式生物,其免疫通路有许多与人类的免疫通路都是保守的,用其研究OVA对机体的作用有助于理解OVA刺激对固有免疫影响的特异性。因此,本文使用OVA刺激线虫,构建OVA刺激线虫应激模型,并通过测定线虫的表观生理状态和生化指标来评价OVA刺激对线虫的作用效果,然后通过基因组测序方法对OVA刺激后线虫的应激反应进行分子水平的描述,以期阐明OVA刺激对线虫固有免疫系统的影响。研究的主要内容、结果和结论如下:1、使用不同浓度OVA刺激L1期线虫,测定OVA刺激24 h、48 h、72 h和96 h后线虫的表观生理状态以及刺激24 h、48 h和72 h后线虫的生化指标。结果显示,1 mg/mL OVA刺激L1期线虫的体长分别为对照组的100%、116.2%、112.5%和115.9%,1 mg/mL OVA促进线虫生长;10 mg/mL OVA刺激L1期线虫的体长分别为对照组的72.6%、89.9%、97.1%和112.7%,10 mg/mL OVA先抑制后促进线虫生长。1 mg/mL OVA减少了线虫脂褐素含量,增加了谷胱甘肽含量,使过氧化氢酶活力增强45.3%,表现出抗氧化作用;10 mg/mL OVA增加了线虫脂褐素含量,减少了谷胱甘肽含量,表现出胁迫作用,但在刺激72 h后减少了ROS含量,胁迫效果减弱。2、使用不同浓度OVA刺激L4期线虫,测定OVA刺激24 h和48 h后线虫的表观生理状态和生化指标。结果显示,线虫的体长和运动行为无显著改变;0.1mg/mL OVA刺激L4期线虫48 h后使线虫过氧化物酶活力增强了28.2%;1 mg/mL OVA和10 mg/mL OVA刺激L4期线虫使得线虫脂褐素含量上升,谷胱甘肽含量下降,OVA刺激线虫表现出低浓度的抗氧化作用和高浓度的胁迫作用。3、对1 mg/mL OVA刺激L1期线虫72 h组、10 mg/mL OVA刺激L1期线虫24 h组和72 h组分别进行基因组测序,基于基因组测序结果对OVA刺激线虫机体固有免疫机制进行初步探讨。结果显示,1 mg/mL OVA刺激72 h使线虫的部分固有免疫基因下调,但线虫通过上调抗逆性基因以平衡应激,对线虫固有免疫作用不明显;10 mg/mL OVA刺激L1期线虫24 h,上调了ERAD通路和溶酶体通路,可能使线虫蛋白错误折叠增加,抑制DAF-16的激活,导致部分固有免疫基因下调;10 mg/mL OVA刺激L1期线虫72 h,线虫激活了未折叠蛋白反应以缓解错误折叠蛋白引起的应激,还上调了可能对OVA代谢起作用的细胞色素P450代谢外源物质途径相关基因,使线虫对OVA的抗性和代谢能力增强。由上可知,低浓度OVA刺激对线虫表现出抗氧化作用,高浓度OVA刺激对线虫表现出胁迫作用,下调线虫的固有免疫基因。L1期线虫在10 mg/mL OVA刺激72 h后可能产生耐受性。