【摘 要】
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背景:垂体腺瘤（Pituitary Adenoma PA）是中枢神经系统肿瘤中发病率最高的良性肿瘤之一,依据内分泌功能分为两大类:功能性垂体腺瘤和无功能性垂体腺瘤,流行病学研究显示,无功能性垂体腺瘤（non-functioning pituitary adenomas NFPAs）约占所有PA的一半。大部分无功能性垂体腺瘤生物学特性偏向良性,对周围组织结构无侵袭浸润,小部分NFPA在生物学特征有恶
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背景:垂体腺瘤（Pituitary Adenoma PA）是中枢神经系统肿瘤中发病率最高的良性肿瘤之一,依据内分泌功能分为两大类:功能性垂体腺瘤和无功能性垂体腺瘤,流行病学研究显示,无功能性垂体腺瘤（non-functioning pituitary adenomas NFPAs）约占所有PA的一半。大部分无功能性垂体腺瘤生物学特性偏向良性,对周围组织结构无侵袭浸润,小部分NFPA在生物学特征有恶性肿瘤的偏向,侵袭性垂体腺瘤（invasive pituitary adenoma,IPA）表现为肿瘤向鞍上、鞍旁及鞍底浸润性生长,破坏鞍底蝶窦顶壁骨,侵入海绵窦和蝶窦内,包绕颈内动脉等。由于侵袭性垂体瘤生长边界不清的特点,手术全切困难,术后复发率高,NFPA其侵袭性是影响手术效果的关键因素,并与患者预后高度相关。Micro RNA是短片段（19～25个核苷酸,miRNA）非编码RNA,在许多生理生化的调节过程起着至关重要作用,包括细胞分化、个体发育、肿瘤的迁移侵袭等。异常的miR-135a-3p表达谱是肿瘤细胞与正常细胞区别之一,提示在肿瘤形成和进展miR-135a-3p扮演了重要角色。现有研究发现,miR-135a-3p的表达在各种神经系统肿瘤组织或细胞中失衡,肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭能力也受其影响。然而,在现有文献中尚未有研究阐明miR-135a-3p在PA组织中的表达以及miR-135a-3p对PA细胞生物学功能的调节作用。目的:通过检测肿瘤组织标本明确miR-135a-3p在侵袭性与非侵袭性NFPA中的表达差异,通过进一步研究设计细胞实验,探索miR-135a-3p在NFPA中增殖及侵袭性的生物学行为作用机制,寻找下游靶点。方法:收集2018年6月-2020年3月青岛大学附属医院神经外科行垂体瘤手术患者50例NFPA组织标本（侵袭性、非侵袭性各25例）检测组织标本中的miR-135a-3p相对表达量,应用荧光定量PCR方法;培育正常大鼠垂体瘤细胞株,随机分组-阴性对照组和实验组,分别转染miR-135a-3p NC和miR-135a-3p inhibitor,检测miR-135a-3p的表达、垂体瘤细胞增殖能力、垂体瘤细胞的迁移能力分别采用荧光定量PCR、CCK8实验、Transwell实验检测;检索生物信息学数据库寻找miR-135a-3p下游靶点,双荧光素酶报告实验验证靶基因与miRNA的相互作用,Western Blot检测miRNA靶基因表达。结果:结果显示,在侵袭性NFPA标本中miR-135a-3p表达量显著高于非侵袭性NFPA组;转染miR-135a-3p inhibitor后垂体瘤细胞株的细胞增殖能力较阴性对照组下降;miR-135a-3p inhibitor组垂体瘤细胞与阴性对照组相比细胞迁移能力下降。预测miR-135a-3p下游靶基因之一:BAK1;敲低miR-135a-3p水平促进BAK1的表达。结论:MiR-135a-3p在侵袭性NFPA中较非侵袭性NFPA明显高表达;敲低MMQ、GH3肿瘤细胞中miR-135a-3p水平,可以明显抑制垂体瘤细胞的增殖及迁移能力;BAK1是miR-135a-3p下游靶基因之一;敲低MiR-135a-3p水平能够促进MMQ、GH3细胞中BAK1的表达,进一步的研究有待揭示BAK1与垂体腺瘤增殖及迁移能力的关系。
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