目的：在我们以既往研究发现先天性斜颈病儿早期病变的胸锁乳突肌中存在多种分化未成熟的细胞的基础上和在临床上应用糖皮质激素局部注射治疗该病取得良好效果的基础上，进一步探讨糖皮质激素局部注射治疗婴幼儿先天性斜颈的机理。 方法： 一、体外实验部分 1、采用胰蛋白和胶原酶混合消化和差速贴壁的方法，从出生后1—2天的Wistar大鼠四肢骨骼肌组织中分离、培养出骨骼肌成肌细胞和骨骼肌间质成纤维细胞，通过光镜、透射电镜、免疫细胞化学方法鉴定所得细胞。 2、取第3代成纤维细胞，采用~3H—TdR掺入法检测DNA合成，MTT比色法检测细胞数目和流式细胞仪细胞周期分析技术检测细胞增殖指数，观察地塞米松对成纤维细胞增殖的影响。应用免疫细胞化学染色方法检测Ⅰ、Ⅲ型胶原，观察地塞米松对成纤维细胞胶原合成的影响。采用Tunel法和电镜观察检测细胞凋亡，观察地塞米松对成纤维细胞凋亡的作用。重庆医科大学博士学位论文 3、取第2代成肌细胞培养，采用MTT法检测细胞数目观察地塞米松对成肌细胞增殖的影响。通过光镜观察成肌细胞融合形成肌小管，Giemsa染色检测细胞融合率及生化方法检测磷酸肌酸激酶活性，观察地塞米松对成肌细胞分化的影响。 4、取80%成肌细胞和20%成纤维细胞混合培养，通过光镜观察成肌细胞融合成肌小管，Giemsa染色检查细胞融合率及生化检测磷酸肌酸激酶活性，观察在地塞米松抑制成纤维细胞的作用后，对成肌细胞分化的影响。 二、临床研究部分 采用B超检查72例先天性斜颈婴儿期病人，比较局部注射醋酸强的松龙治疗前后病侧胸锁乳突肌前后径和左右径大小的变化和回声性质的改变，以及和既往手法矫正治疗对比。观察糖皮质激素局部注射后在临床上对减轻和防止病变胸锁乳突肌纤维化方面的作用。 结果: 1、在体外培养的条件下，浓度为10“smol几一10一”mol几的地塞米松能抑制成纤维细胞DNA合成，减少成纤维细胞的增殖数目，降低成纤维细胞的增殖指数，其作用随浓度增大而增强。 2、成纤维细胞经10一6mol几地塞米松作用后胶原表达受抑制，I、nl型胶原染色明显变浅。 3、10一gmof几一10一’mof几浓度地塞米松显著促进成纤维细胞凋亡，并呈剂量依赖关系，电镜下见成纤维细胞形成凋亡小体。重庆医科大学博士学位论文 4、在10一gmol几一10一smol几浓度范围内，地塞米松对成肌细胞的增殖无抑制和增殖作用。对成肌细胞肌小管形成和细胞融合率无明显影响。对成肌细胞磷酸肌酸激酷的活性也无明显影响。 5、成纤维细胞和成肌细胞混合培养，成肌细胞分化受到抑制，成肌细胞肌小管形成、细胞融合率及磷酸肌酸激酶活性明显低于单纯成肌细胞培养组。 6、在成纤维细胞和成肌细胞混合培养中，10一知oI几一10一smol几浓度地塞米松组较未加地塞米松组成肌细胞融合率和磷酸肌酸激酶活性增高，但仍低于单纯成肌细胞组。 7、B超随访检查结果 l)醋酸强的松龙局部注射后，患侧胸锁乳突肌左右径接近健侧，但前后径仍大于健侧。 2)注射治疗后病侧胸锁乳肌回声性质为与健侧等同的病例数增多，强回声和强弱不均回声的病例减少，未发现低回声病例。 3)注射治疗后较单纯手法矫正病例，病侧胸锁乳突肌回声性质为强回声的病例明显减少，强弱不均的病例增多，与健侧等同回声的病例明显增多。 结论: 地塞米松在体外培养条件下，能够抑制骨骼肌间质成纤维细胞增殖，促进成纤维细胞凋亡，减少I、111型胶原的表达。在相同浓度地塞米松条件下，地塞米松对成肌细胞的增殖和分化无明显影响。并且，地重庆医科大学博士学位论文塞米松在成纤维细胞和成肌细胞混合培养过程中可通过抑制成纤维细胞的作用，间接促进成肌细胞的分化。本研究提示临床上患侧胸锁乳突肌局部注射糖皮质激素可抑制胸锁乳间质成纤维细胞过度增殖，有利于成肌细胞分化成肌，减少肌肉纤维化。临床B超随访也观察到糖皮质激素有减少病例胸锁乳突肌纤维化程度的效果。