核桃种皮多酚的抗肿瘤及免疫活性研究

来源 :天津科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zzc2001
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核桃营养价值及其丰富,而核桃仁种皮中的多酚类物质具有广泛的生理活性。因此,从种皮中提取多酚物质,用于功能性食品的开发,中药的研制,对产品附加值的提升有重要的意义。因此,本论文以山西汾阳纸皮核桃的种皮为原料,对其所含成分及结构进行分析,并深入研究了其提取物的免疫活性、体外抗肿瘤活性及体内抗肿瘤活性。主要研究结果如下:(1)利用盐液浸渍法去除核桃仁种皮,并对核桃仁种皮的水分、灰分、蛋白质、脂肪、锌、钙的含量进行了测定,其中锌的含量比一般核桃仁高出 5.78倍,钙的含量高出2.29倍。(2)利用超声波辅助的方法提取多酚,核桃种皮粗提物的提取率为14.34%,粗提物中核桃仁种皮多酚的含量为19.10%。经过NKA-9大孔树脂纯化后,样品纯度为65.2%左右。(3)紫外检测发现种皮提取物在268 nm处及360 nm处有特征吸收峰,说明核桃仁种皮提取样品中含有多酚类物质。红外检测发现核桃种皮提取物含有多酚的多个特征官能团,初步确定化合物的组成为多酚类物质。(4)免疫活性研究结果表明,核桃仁种皮多酚具有一定的提高免疫力的作用,核桃仁种皮多酚能够改善试验小鼠的脏器指数,提高碳廓清指数,使淋巴细胞的增值率提高,在一定程度上维持免疫抑制小鼠的血液平衡,增加免疫抑制小鼠的免疫球蛋白含量,增强LDH和ACP酶的活力,从而提高试验小鼠机体的免疫活性。(5)通过不同浓度和作用时间研究核桃仁种皮多酚体外对H22肝癌细胞的抑制作用,发现50 μg/mL的核桃仁种皮多酚对H22肝癌细胞的抑制率较低,只有15%左右,但在200 μg/mL和400 μg/mL时没有显著性差异,均在培养72h时达到最大抑制率。(6)选用H22肝癌小鼠模型,研究多酚的体内抗肿瘤活性,研究结果发现,核桃仁种皮多酚可以有效保护试验小鼠的免疫器官,通过测定试验小鼠脾脏T细胞和B细胞的增殖情况,发现核桃仁种皮多酚可以提高试验小鼠的脾淋巴细胞活性,提高脾脏T细胞的比例。而通过各组小鼠外周血各项指标的检测表明核桃仁种皮多酚能有效维持荷瘤小鼠血液各种细胞的平衡,增强体内T细胞和B细胞的活性。通过对小鼠实体瘤H&E染色观察可知,核桃仁种皮多酚能够使小鼠实体瘤内部分细胞形态异常,出现凋亡现象,肿瘤细胞出现核固缩和核消失等细胞坏死现象,从而使小鼠抗肿瘤免疫能力有所提高。
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