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目的:研究复方玉郎伞多糖(CYLSP)与复方玉郎伞水提物(CYLSA)体外抗HBV和体内抗DHBV的治疗作用研究及对小鼠肝损伤的保护作用研究。方法:(1)体外抗HBV作用:采用MTT法检测CYLSP和CYLSA对HepG2.2.15细胞的毒性,分别计算CYLSP和CYLSA对细胞的TC50和TC0;在TC0条件下,采用直接加药法检测不同浓度的CYLSP和CYLSA对细胞的作用,并收集第72h和第144h后的细胞液,检测细胞液中HBV DNA的水平及HBsAg和HBeAg的滴度。(2)体内抗DHBV作用:用静脉注射感染DHBV的1d龄广西麻鸭,饲养7d后采血筛选后随机分为8组,每组10只:模型组和3TC组;CYLSP高、中、低剂量组;CYLSA高、中、低剂量组。除模型组外,各组麻鸭持续灌胃给药14d,于用药7d(T7)和14d(T14)后分别采血,停药3d(P3)后采血并摘取麻鸭肝脏,分别检测鸭血清中DHBV DNA的含量和DHBsAg和DHBeAg的滴度及ALT和AST的含量。同时检测鸭肝脏匀浆液中的SOD、GSH、GSH-PX和MDA的含量,HE染色观察鸭肝脏组织病理学变化。(3)小鼠肝损伤:将正常小鼠随机分为9组,每组10只:正常组、模型组和阳性组(DDB)组;CYLSP高、中、低剂量组;CYLSA高、中、低剂量组。各组小鼠每天定时称重并空腹灌胃给药1次,连续给药7d。末次给药1h后,除正常组外,其余各组均腹腔注射0.1%CCl4花生油溶液,禁食24h后进行指标检测。结果:(1)体外抗HBV:MTT法结果表明CYLSP及CYLSA的TC50分别为103.88mg/L,242.84mg/L;TC0分别为12.66mg/L,20.68mg/L。在TC0条件下,CYLSP及CYLSA含药培养液能有效的抑制细胞培养液中HBVDNA的含量及HBsAg及HBeAg的分泌,抑制作用有明显的量效和时效关系。TI大于2表明CYLSP和CYLSA对细胞的毒性较低,可进一步用于实验研究。由实验数据可知CYLSP的体外抗病毒作用比CYLSA稍好。(2)体内抗DHBV:给药7d(T7)和14d(T14)后,与模型组比较,CYLSP与CYLSA各给药组鸭血清中DHBV DNA的含量明显降低(P<0.05或P<0.01),且CYLSP与CYLSA高剂量组显著降低;停药3d后,CYLSP与CYLSA中、低剂量组及3TC组鸭血清中DHBV DNA的含量有反跳现象,高剂量组无反跳现象,DHBsAg与DHBeAg的滴度变化与DHBV DNA的含量变化相似;给药7d(T7)和14d(T14)后鸭血清中ALT和AST含量显著降低;停药3d后,CYLSP及CYLSA各给药组鸭肝匀浆液中SOD、GSH和GSH-PX含量升高,MDA的含量降低,鸭病理切片结果显示CYLSP及CYLSA对DHBV引起的肝损伤有保护作用。由实验数据可知CYLSP的体内抗病毒效果更好,作用更强。(3)小鼠肝损伤:模型组与正常组比较,小鼠肝脏指数、小鼠血清中ALT和AST的含量显著升高,肝脏匀浆液中SOD、GSH和GSH-PX的含量显著降低,MDA的含量显著升高,表明小鼠急性化学性肝损伤造模成功。各给药组与模型组比较,CYLSP及CYLSA高、中剂量组及DDB组均能降低小鼠肝脏指数及小鼠血清中ALT和AST的活性,升高肝脏匀浆液中SOD、GSH和GSH-PX的含量,降低MDA的含量。小鼠病理切片结果发现CYLSP及CYLSA对CCl4导致的肝损伤均有保护作用。CYLSP对小鼠肝损伤的保护作用更强。结论:CYLSP及CYLSA毒性低,有明显的体外抗HBV作用,对DHBV诱导的鸭肝损伤有明显的保护作用,改善肝脏功能,同时对CCl4引起的小鼠急性化学性肝损伤有明显的保护作用。