NeuroD蛋白对小鼠急性放射性肠损伤治疗作用及作用机制的研究

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目的:本研究通过观察NeuroD蛋白对小鼠急性放射性肠损伤的治疗作用,初步探讨其作用机制,为临床急性放射性肠损伤的防护与治疗提供新思路。  方法:动物模型制备及分组:雄性C57BL/6J小鼠11GyX射线全身照射,治疗组每只小鼠照射后30min腹腔注射给予1mgNeuroD蛋白,对照组每只小鼠照射后30min腹腔注射给予10μlEGFP。(1)采用病理切片HE染色,观察NeuroD蛋白对急性放射性肠粘膜病理损伤的修复作用。(2)采用免疫组化法,观察NeuroD蛋白对肠道隐窝干细胞增殖分化能力的促进作用。(3)检测体重和存活率的变化,观察NeuroD蛋白整体救治效果。(4)采用PCR法,检测肠道islet-1mRNA的表达水平,初步探讨NeuroD蛋白急性放射性肠损伤治疗作用的机制。  结果:(1)NeuroD治疗组照射后84h肠粘膜未见出血,96h可见大量再生隐窝;EGFP对照组照射后84h肠粘膜损伤严重,绒毛脱落呈裸露,粘膜下层大片出血,96h未见再生隐窝。(2)NeuroD治疗组照射后96h隐窝基底部可见许多深棕色、淡棕色胞浆染色的阳性细胞;EGFP对照组96h几乎未见阳性细胞。(3)NeuroD治疗组小鼠的体重和存活率较EGFP对照组无显著差别(p>0.05)。(4)NeuroD治疗组几乎未见肠道islet-1mRNA表达,目的条带不清楚,亮度极低,与EGFP对照组无明显差别。  结论:NeuroD蛋白可以促进急性放射性肠粘膜病理损伤的修复作用,提高肠道隐窝干细胞的增殖分化能力,但小鼠存活率并无显著提高。此外,NeuroD蛋白不通过激活肠道islet-1基因表达这条途径发挥治疗作用,具体机制待进一步探究。
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