【摘 要】
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抗生素治疗细菌感染导致了许多耐药菌的产生,而耐药菌对人类生命安全有着重大威胁。所以具有抗耐药性、低毒性、安全性高的抗菌药物体系研究具有很大的意义。钌配合物的探针具有独特的优势,如良好的化学稳定性、发光性能、生物相容性以及较低的细胞毒性,使其广泛应用于分子传感器领域;蒙脱土（MMT）可作为一种的“粘性”构件,通过细菌分泌的细胞外聚合物（EPS）将抗菌纳米颗粒锚定在细菌细胞表面;基态光敏剂受到特定激发
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抗生素治疗细菌感染导致了许多耐药菌的产生,而耐药菌对人类生命安全有着重大威胁。所以具有抗耐药性、低毒性、安全性高的抗菌药物体系研究具有很大的意义。钌配合物的探针具有独特的优势,如良好的化学稳定性、发光性能、生物相容性以及较低的细胞毒性,使其广泛应用于分子传感器领域;蒙脱土（MMT）可作为一种的“粘性”构件,通过细菌分泌的细胞外聚合物（EPS）将抗菌纳米颗粒锚定在细菌细胞表面;基态光敏剂受到特定激发波长的光照变成激发态,激发态的光敏剂又把能量传递给周围的氧,生成活性氧,引起靶组织细胞坏死或凋亡,但几乎不影响周围组织。本文首先合成了钌配合物（Com-Ru）和球形钌配合物（Sph-Ru）,根据TEM,SEM可知Sph-Ru相较于Com-Ru分散性更好,形态规则为球形,粒径分布在10～15nm。随后以Sph-Ru为核心在其表面包裹蒙脱土（MMT）和酞菁锌（PZ）,合成了具有荧光检测功能的Sph-Ru-MMT@PZ球形纳米颗粒。通过TEM,SEM,IR,可证明其具有良好的分散性,形态均一为规则圆球形,粒径分布在140nm左右。Com-Ru、Sph-Ru、Sph-Ru-MMT、Sph-Ru-MMT@PZ四种材料对大肠杆菌（Escherichia coli）、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、四链球菌（Micrococcus tetragenus）的抑菌效果发现Sph-Ru-MMT@PZ+IR具有广谱抗菌活性,其中对大肠杆菌的抑菌活性最强,这种结果可能是Sph-Ru-MMT@PZ+IR能通过MMT将纳米粒子靶向粘附在细胞周围,670nm光源照射使得酞菁锌分解释放ROS,提升细胞内ROS水平,这导致细胞的氧化损伤并影响细胞中大分物质的活性和功能,使细菌死亡。为了进一步验证这个结论,通过流式细胞仪分析得出细胞内ROS含量与药物浓度具有依赖性。荧光标记试验表明Sph-Ru-MMT@PZ+IR能杀死细菌并且在细菌死亡的情况下发出荧光,而同浓度的Com-Ru、Sph-Ru、Sph-Ru-MMT、Sph-Ru-MMT@PZ处理的大肠杆菌不发出荧光。这个结果可能是由于大肠杆菌的内外形态被明显破坏导致细胞内含物的大量流出,这些内含物与钌配合物结合,使得在溶剂中原本无荧光的钌配合物发出荧光。通过酶标仪测量420 nm处的ONP吸光度值和大肠杆菌的扫描电镜、透射电镜证实药物能够破坏细胞和细胞质膜,导致内含物流出。
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