钴铬钼纳米微粒对雄性大鼠生殖毒性的相关研究

来源 :南京医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:QINSHAOKUN1988
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目的:探讨利用等离子体法制备钴铬钼(CoCrMo)纳米微粒应用于生物医学研究的可行性。方法:利用直流电弧等离子体法在氢氩混合环境下,将人工金属股骨头制备成CoCrMo微粒。利用电子透射显微镜对微粒进行形貌、粒度观察,应用Simple-PCI软件对微粒的平均粒径进行分析,采用荧光光谱仪和能量衍射X射线分析法测定微粒的化学成分。将CoCrMo微粒悬浮于生理盐水中,调整pH至7.4,560W超声振荡20min后,利用Zeta电位仪检测微粒在生理盐水中的分散性能。结果:电子透射电镜检测结果显示,等离子体法制备的金属纳米微粒外形主要为圆形和椭圆形,边缘光滑,呈长链状排列。Simple-PCI软件分析结果显示,微粒的平均粒度为54?22nm(14~146nm)。荧光光谱仪和能量衍射X射线分析结果显示,CoCrMo复合粉主要是Co粉和Cr粉的混合物,共占95.47%,还含有少量的Fe、Ni、Mo、C,其中,Co占69.7%、Cr占25.7%、Mo占2%、C占0.3%。Zeta电位仪检测结果显示,经超声振荡处理后,CoCrMo纳米微粒在生理盐水中的动态直径集中于194.4-284.9 nm,大多数呈现聚集状态,其Zeta电位为16.53mv。结论:利用等离子体法制备的CoCrMo纳米微粒,其性状和化学成分与体内分离的金属磨损微粒接近,可以作为研究金属对金属人工髋关节置换术后金属磨损微粒生物学效应的理想实验材料。目的:探讨关节腔内注射CoCrMo纳米微粒对成年雄性SD大鼠生殖功能的影响。方法:将75只8周龄雄性SD大鼠随机分为5组,每组15只。对照组膝关节腔内注射生理盐水,基础量组、低剂量组、中剂量组及高剂量组分别注射剂量为50、250、500和1000 μ g/kg的CoCr纳米微粒生理盐水悬液,1次/周,连续10周。第11周处死动物,计算睾丸/体重系数,检测附睾精子活力、精子计数、精子畸形率及精子凋亡率,测定血清及睾丸中Co、Cr离子含量,血清雄激素水平,测定睾丸组织中抗氧化酶活力以及丙二醛的含量,观察滑膜和睾丸组织的病理变化。结果:各剂量组与对照组相比,睾丸/体重系数差异无统计学意义(P>0.05)。中剂量组精子平均运动速率、鞭打频率和精子计数较对照组下降,精子畸形率及精子凋亡率较对照组上升,差异具有统计学意义(P<0.05)。高剂量组精子平均运动速率、直线运动速率、曲线运动速率、鞭打频率和精子计数较对照组下降,精子畸形率及精子凋亡率较对照组上升,差异具有统计学意义(P<0.05)。各剂量组血清和睾丸中Co、Cr离子含量随注射剂量的增加呈上升趋势,差异具有统计学意义(P<0.05)。高剂量组血清睾酮水平比对照组下降,差异有统计学意义(P<0.05):实验组与对照组相比,血清促卵泡激素与黄体生成素差异无统计学意义(P>0.05)。中、高剂量组SOD活力分别较对照组、基础量组和低剂量组下降,高剂量组GSH-Px活力较前四组下降,中、高剂量组CAT活力分别较对照组、基础量组和低剂量组下降,高剂量组MDA含量较前四组上升,以上差异均具有统计学意义(P<0.05)。各剂量组滑膜组织出现不同程度的充血、渗出,金属微粒沉积,毛细血管扩张和炎性细胞浸润等病理变化。与对照组比较,基础量组、低剂量组睾丸组织无明显病理改变;中剂量组出现部分生精小管生精上皮结构紊乱,腔室层与基底层间隙增大,管腔内可见脱落的生精细胞团块;高剂量组可见生精小管萎缩,生精上皮呈空泡样改变,细胞层次结构消失,腔室内精子数量明显减少。结论:关节腔内注射中、高剂量的CoCrMo纳米微粒可能对雄性大鼠生殖功能造成不良影响。
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