目前，各种直径大小的血管移植物的需求日益增多。临床应用中，一般认为Dacron(涤纶)、ePTFE(聚四氟乙烯)等合成型血管在大口径血管移植中效果可靠，有肯定的远期通畅率。但是，在小口径血管(内径＜6mm)移植中，由于血管中高张力、低血流的特殊状态，导致了很高的移植失败率。小口径血管移植物的研究仍然面临很大困难：合成型血管由于吻合处易发生内膜增生和血栓形成，远期通畅率并不满意；自体血管由于来源有限，异体血管和异种血管由于易产生免疫排斥反应，临床应用也受到限制；组织工程化血管的制备工艺还不成熟。因此，构建一种良好的小口径血管移植物正成为人工血管研究的热点。本研究采用原代培养的兔动脉内皮细胞作为种子细胞，以超低温处理去除内皮细胞的大鼠颈动脉血管为血管基质，旋转加静态培养使其完成内皮化，然后进行植入兔股动脉的动物实验，为小口径血管移植材料的研究尝试新的思路，并探讨异种血管移植的免疫排斥及早期通畅率等问题。 本研究的主要内容和结论是： 1.采用改进的Ⅱ型胶原酶消化法获取兔动脉内皮细胞，进行原代及传代培养，并对细胞进行鉴定。光镜下观察，酶消化法分离、培养的原代兔动脉内皮细胞呈典型的“铺路石”状镶嵌排列，细胞为扁平多角形。透射电镜下可见培养细胞浆内Weibel-Palade小体。结果表明，培养的原代内皮细胞具有内皮细胞的正常特征，可以用于实验研究。 2.采用超低温处理去除Wistar大鼠颈总动脉(内径约1mm)的内皮细胞。H&E染色和扫描电镜观察的结果显示，采用超低温处理的Wistar大鼠颈动脉血管内皮细胞完全去除，处理后的血管其他组织保留完整。 3.原代培养至2-3代的兔动脉内皮细胞(RAECs)高密度(2×106cell/cm2)接种于去除内皮细胞的大鼠血管内腔面，旋转培养2h后，再在37℃，5％CO2条件下静态培养3-5天。AgNO3染色和扫描电镜下观察：将RAECs种植于超低温处理后的大鼠颈总动脉内腔面3-5天后，细胞完全覆盖血管内壁，融合成单层。 4.以正常异体兔股动脉(RAGs)组和去内皮Wistar大鼠颈动脉(DRAGs)组作为对照组，将重新内皮化Wistar大鼠颈动脉(RRAGs)植入兔股动脉，进行动物实验(每组六只)，检测组织病理学变化、内皮细胞覆盖情况及其早期的通畅率。通过扫描电镜和H&E染色切片观察：移植后1周，RRAGs组移植段内腔有大量内皮细胞，外膜少量淋巴细胞浸润，与RAGs组结果类似；而DRAGs组内腔弹力膜裸露，少量内皮细胞覆盖，外膜大量淋巴细胞浸润。移植后4周，RRAGs组移植段通畅，内腔基本被内皮细胞覆盖，细胞沿血流方向排列，与RAGs组类似；而DRAGs组血管移植段有大量血栓形成。RRAGs组和RAGs组的四周累计通畅率分别为66.7％和83.3％，而DRAGs组则只有50％。