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瓜蒌(Trichosanthes kirilowii Maxim.),属于葫芦科栝楼属(Trichosanthes Linn.),多年生攀援草本,是山东著名道地药材,具有解热祛痰,化瘀理气,清肠通便等药理活性,在治疗胸痹、便秘等方面效果较佳。瓜蒌多糖(Trichosanthes kirilowii Maxim.polysaccharide,简称TKMP)是瓜蒌中的重要组分,大量研究表明,多糖在抗氧化、抗肿瘤、降血糖、免疫调节等方面展现出诱人的前景。据文献调研,目前国内外对瓜蒌多糖少有研究。本研究主要进行了瓜蒌多糖的提取工艺、黏度特性、分离纯化及其抗氧化和心脏毒性保护活性等方面的研究,为瓜蒌多糖进一步开发利用提供理论支持。主要研究成果如下:1.TKMP最佳提取工艺的确定:以单因素试验作为正交试验设计的依据,对TKMP超高压提取最佳工艺条件进行研究,最终得出在以水为提取溶剂,提取压力为100 Mpa,提取时间3 min,料液比为1:40(g/m L)的条件下,多糖得率最高,为19.11%,比HRE法低0.32%,UAE法高1.00%,但提取时间却仅为HRE法和UAE法的1/10和1/20。2.TKMP的黏度特性研究:分别探讨了采用UPE法和HRE法提取的TKMP溶液的浓度、温度、pH值及不同金属离子对其黏度的影响,结果显示:TKMP是一种低黏度多糖,上述各因素对其黏度均有一定的影响。溶液浓度与黏度呈正相关;溶液温度与黏度呈负相关;酸碱和金属离子对其黏度的影响不大,说明该多糖性质比较稳定。采用UPE法提取的多糖溶液黏度略低于HRE法。3.TKMP的分离纯化及其初级结构表征:TKMP首先采用Sevage法脱蛋白,然后进行DEAE-52纤维素柱层析,分别用0、0.05 M、0.1 M、0.2 M的Na Cl洗脱,得到相应的四个组分TKMP-1、TKMP-2、TKMP-3、TKMP-4,对含量最高的组分TKMP-1采用Sephadex G-75柱层析进一步分离纯化,用蒸馏水洗脱,得到两个组分TKMP-1-1、TKMP-1-2,经HPGPC法鉴定,TKMP-1-2为均一稳定的纯品,其分子量为12 KDa。GC-MS结果显示:TKMP-1-2单糖组成及其摩尔比为:L-阿拉伯糖:D-甘露糖=1:2.72。TKMP-1-2是一种典型的多糖类化合物,其糖环为呋喃环,有α-型糖苷键和β-型糖苷键两种连接方式。4.TKMP体外抗氧化活性研究:通过测定TKMP对DPPH·、O2-·、·OH、H2O2的清除率及总还原能力,考察TKMP的体外抗氧化活性。结果表明:DPPH·、O2-·、·OH、H2O2的清除率均具有浓度依赖性,IC50值分别为0.63 mg/mL、1.48 mg/mL、4.04 mg/mL、1.03 mg/mL,总还原力与TKMP浓度呈正相关,当TKMP浓度为0.5mg/m L时,还原能力达到最大。纯化组分TKMP-1-2对DPPH·、O2-·的清除效果不如粗多糖好。5.TKMP对特非那定诱导的斑马鱼心脏毒性保护活性研究:实验分为低剂量组(1μg/mL)、中剂量组(10μg/mL)和高剂量组(100μg/mL),分析TKMP与TKMP-1-2对特非那定导致的斑马鱼心率减慢的影响。结果表明:低剂量组均能明显提高斑马鱼心率,高剂量组斑马鱼死亡。