驱蚊草与罗勒的组织培养和细胞学融合研究

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驱蚊草,芳香类天竺葵多年生草本植物,它是非洲的天竺葵和中国的香茅草的细胞融合的产物。驱蚊草可以通过叶片散发香茅醛,具有良好的驱蚊效果,同时具有提神醒脑、抗菌、抗忧郁、缓解压力的作用,被誉为“神草”。但由于驱蚊草是体细胞杂合产物,所以种子不育,而用常规扦插的方法繁殖率又很低,因此采用离体快速繁殖技术才是实际可行的技术手段。罗勒不仅是重要的调香原料,而且还具有驱虫、驱蝇功效。生物技术的发展使得通过驱蚊草、罗勒原生质体融合培育驱蚊驱蝇新品种成为可能。本实验建立了完善的驱蚊草、罗勒组培体系,并对驱蚊草、罗勒原生质体融合的条件进行了初步分析,主要结果如下:1.以MS为基本培养基,运用正交设计方法,利用植物组织、细胞培养技术,成功地建立了驱蚊草和罗勒的组织培养快繁技术体系。驱蚊草的组织培养体系的最佳条件:不定芽诱导的最适培养基为MS+6-BA0.2mg·L-1+NAA0.3mg·L-1;生根培养基为1/2MS+NAA0.4mg·L-1;最适愈伤组织诱导培养基为MS+2,4-D0.5mg·L-1+6-BA2.0mg·L-1+NAA0.3mg·L-1。罗勒的最佳条件:壮苗的最适培养基为MS+6-BA0.2mg·L-1+NAA0.2mg·L-1+KT0.3mg·L-1;生根培养基为1/2MS;愈伤组织诱导最适培养基为MS+2,4-D0.5mg·L-1+6-BA3.0mg·L-1+NAA0.5mg·L-1。2.本研究对酶解最佳条件进行研究,得出分离驱蚊草原生质体酶解条件以CPW-13进行质壁分离1h,2.0%纤维素酶和0.4%果胶酶,0.5M甘露醇为渗透压,27℃黑暗下80r/m酶解处理8h为好,产量可达1.67×106个/g,原生质体活力为87.4%;分离罗勒原生质体酶解条件以CPW-13进行质壁分离1h,1.6%纤维素酶和0.4%果胶酶,0.5M甘露醇为渗透压为好,27℃黑暗下80r/m酶解处理8h,产量可达2.14×106个/g,原生质体活力为67.8%。3.通过PEG诱导原生质体融合的研究,得出驱蚊草和罗勒的最佳融合条件为:PEG6000的浓度为30%、Ca2+浓度为0.3 mg·L-1,pH值为10.5时融合百分率最高,可达11.2%。
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