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在女性癌症中,乳腺癌是常见的恶性肿瘤,发病率及死亡率均居首位。目前,仍没有有效的治疗方法可以治愈转移性乳腺癌,肿瘤转移导致了乳腺癌患者的高死亡率。基质金属蛋白酶家族(MMPs)是降解细胞外基质的主要酶类,其中MMP9可降解细胞外基质的主要成分,在肿瘤细胞侵袭转移中具有重要作用。细胞命运决定因子(DACH1)在多种癌细胞中低表达或表达缺失,被认为是一种新的抑癌基因。研究表明,DACH1可抑制乳腺癌细胞的侵袭转移,但对其作用机制的研究仍然不全面。本研究探讨了 DACH1通过调控MMP9表达抑制乳腺癌细胞侵袭转移的分子机制。首先,在ZR-75-30细胞和MCF-7细胞中进行了细胞划痕和侵袭小室实验,结果表明DACH1抑制乳腺癌细胞的侵袭转移。其次,通过反转录PCR(RT-PCR)和免疫印迹实验发现DACH1显著下调MMP9的mRNA水平和蛋白水平,同时明胶酶谱实验证明细胞分泌的活性MMP9明显减少。荧光素酶报告基因实验表明DACH1明显抑制了 MMP9启动子的活性。通过MMP9启动子的截短体、突变体进行的报告基因实验及染色质免疫共沉淀实验表明DACH1通过MMP9的核转录因子-κB(NF-κB)和-79至-73 bp的激活蛋白1(AP-1)位点抑制MMP9的转录。之后,通过免疫共沉淀(CoIP)和连续免疫染色质共沉淀(ChIP-reChIP)实验表明,DACH1在NF-κB和-79至-73 bp的AP-1位点抑制MMP9的转录时,分别与NF-κB p65和 AP-1 c-Jun 互作。最后,通过CoIP实验表明,在NF-κB位点,DACH1与组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)、p65与HDAC1均可发生互作,且DACH1可促进p65与HDAC1的互作,促进HDAC1对p65的去乙酰化作用,从而抑制p65的转录活性。本研究主要证明,DACH1可通过抑制MMP9的转录抑制乳腺癌细胞的侵袭转移,其调控机制很可能是,DACH1分别与p65和c-Jun互作,作用于NF-κB和-79至-73 bp的AP-1位点抑制MMP9表达,具体的在NF-κB位点,DACH1招募HDAC1促进p65的去乙酰化,从而抑制了 p65的转录活性。这些研究丰富了对DACH1抑制肿瘤转移的认识,为肿瘤转移的治疗提供了新的思路。