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海藻酸裂解酶是一种多糖裂解酶，可通过β-消除反应裂解海藻酸单体间的糖苷键，催化生成一系列的寡糖链。随着近年来一些海藻寡糖重大药用价值的发现和海藻酸裂解酶作为一种药用酶的需求，海藻酸裂解酶的综合应用研究也显得更加重要。
本课题利用数据库中Vibrioalginolyticus40B的全基因组序列设计探针引物克隆到V.alginolyticusATCC17749中5个可能的海藻酸酶基因algV1、algV2、algV3、algV4、和algV5，并将其克隆到表达载体pET28a上，分别构建了pET28a-algV1、pET28a-algV2、pET28a-algV3、pET28a-algV4和pET28a-algV5五个表达质粒，实现了五个基因在大肠杆菌BL21(DE3)中的高效表达。通过海藻酸裂解酶定性测活和定量测活实验，验证了其中algV1、algV2、algV3和algV5为海藻酸裂解酶基因，并且通过对发酵上清液和菌体裂解上清液的定量测活发现ALGV1、ALGV2和ALGV3为胞外酶，而ALGV5为胞内酶。algV1、algV2、algV3和algV5对应的大肠杆菌重组菌的海藻酸裂解酶总酶活分别达到644.1U/L、4347U/L、1011U/L和245.3U/L，其中pET28a-algV2/BL21(DE3)具有一定的工业应用的价值。
海藻酸裂解酶ALGV2在温度30℃，pH8.6的Gly-NaOH缓冲液中发挥最大的酶活力。30℃保温1h后，酶活力损失54％。NaCl离子浓度在300mM～500mM时，ALGV2的酶活力最高。KCl、Fe3+、Ca2+对ALGV2的酶活力发挥有促进作用，硫酸铵、Ba2+、Mn2+、EDTA等对酶活力影响不显著，Mg2+、Zn2+、Cu2+以及表面活性剂SDS对酶活力的发挥有抑制作用。100mL反应体系中，ALGV2(22U)在室温下对0.2％海藻酸钠的降解作用时间为8.5h。利用SephadexG-25将酶解产物纯化后，ESI-MS分析终产物的分子量为528Da，为三糖的分子量大小。
解藻酸弧菌(V.alginolyticus)ATCC17749株海藻酸裂解酶在大肠杆菌中异源表达并可取得较高的活性。由此可看出利用基因工程的方法生产海藻酸裂解酶有较大的发展前景，可满足市场日益增长地对海藻酸裂解酶的需求。