【摘 要】
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随着人们对自身健康管理的进一步提升,人们对药食同源产品的需求也越来越大,随之而来的质量问题也受到了大家的关注。蜂蜜、葛根和山银花作为药食同源产品,黄酮类化合物是其主要的有效成分,目前对于黄酮类化合物的检测多是以测总黄酮为主,本研究针对蜂蜜、葛根和山银花中的黄酮类化合物建立了相应的液相色谱-串联质谱测定方法:1.建立固相萃取（Solid-Phase Extraction,以下简称SPE）净化-液相色
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随着人们对自身健康管理的进一步提升,人们对药食同源产品的需求也越来越大,随之而来的质量问题也受到了大家的关注。蜂蜜、葛根和山银花作为药食同源产品,黄酮类化合物是其主要的有效成分,目前对于黄酮类化合物的检测多是以测总黄酮为主,本研究针对蜂蜜、葛根和山银花中的黄酮类化合物建立了相应的液相色谱-串联质谱测定方法:1.建立固相萃取（Solid-Phase Extraction,以下简称SPE）净化-液相色谱-串联质谱法测定蜂蜜中16种黄酮类化合物和阿魏酸含量的方法。蜂蜜样品用p H=2的盐酸溶液进行稀释,通过C18SPE小柱净化,采用液相色谱-串联质谱法分析检测,外标法定量测定。用“蜂蜜空白”基质处理溶液配制0～200μg/kg的系列标准曲线,线性相关系数大于0.997,方法定量限（以信噪比S/N＞10计）为20μg/kg。在蜂蜜样品中进行添加水平为20、40、100μg/kg的添加回收试验,方法总体回收率为64.5%～113%,相对标准偏差（RSD）为1.4%～14.5%。2.建立了盐酸乙醇溶液水解提取-SPE净化-液相色谱-串联质谱法测定葛根中11种黄酮苷元含量的方法。葛根样品经50%的乙醇溶液（含10%浓盐酸）回流2小时对代表性黄酮苷进行水解并提取11种黄酮苷元,SPE小柱净化,采用液相色谱-串联质谱法进行检测,外标法定量。配制0.5 g/kg～25 g/kg线性工作曲线,线性相关系数大于0.996,方法定量限（以信噪比S/N＞10计）为0.5 g/kg～1.0 g/kg。在葛根粉末中添加各黄酮苷（相当于水解后相应黄酮苷元含量为2.5 g/kg、5 g/kg和10 g/kg）,进行添加回收试验,方法总体回收率为67.8%～102%,相对标准偏差（RSD）为3.5%～12.0%。3.建立了酸性乙醇溶液回流水解提取-SPE净化-液相色谱-串联质谱法测定山银花中槲皮素、木犀草素、山奈酚、芹菜素和黄芩素5种黄酮苷元含量的方法。山银花样品经50%的乙醇溶液（含10%浓盐酸）回流2小时水解黄酮苷同时对黄酮苷元进行提取,SPE小柱净化,液相色谱-串联质谱法进行检测,外标法定量。配制0～1 g/kg线性工作曲线,线性相关系数大于0.995,方法定量限（以信噪比S/N＞10计）为0.005g/kg～0.05g/kg。在山银花样品中进行添加回收试验,加入各黄酮苷（相当于水解后槲皮素和木犀草素含量为0.1 g/kg、0.2 g/kg和0.4 g/kg,山萘酚、芹菜素和黄芩素含量为0.05 g/kg、0.1 g/kg和0.2 g/kg）,方法平均回收率为70.4%～104%,相对标准偏差（RSD）为4.0%～12%。4.建立了采用甲醇溶液超声提取-SPE净化-液相色谱-串联质谱法测定山银花中4种有机酸和14种黄酮类化合物含量的方法。通过50%的甲醇溶液超声提取山银花样品40分钟,经SPE小柱净化,供液相色谱-串联质谱法进行检测,采用外标法定量测定。配制标准溶液工作曲线0.05 g/kg、0.10 g/kg、0.20 g/kg、0.50 g/kg和1.00 g/kg,线性相关系数大于0.993,方法定量限（以信噪比S/N＞10计）为0.005 g/kg～0.05 g/kg,在山银花样品中添加各化合物（添加水平绿原酸10.0、20.0和40.0 g/kg,咖啡酸1.0、2.0和4.0 g/kg,异绿原酸A和异绿原酸C 5.0、10.0和20.0 g/kg,其他化合物0.05、0.10和0.20 g/kg）,进行添加回收试验,方法总体回收率为69.2%～116%,相对标准偏差（RSD）为3.3%～12.0%。
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