补肾涤痰汤对青春期多囊卵巢综合征的实验及临床研究

来源 :南京中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Jul-83
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目的:由于多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)病因病机的不明确性,疾病表现的异质性,所以中医药治疗本病有独特的优势。中医的治未病以及整体观提示我们应该对青春期PCOS患者进行完善的管理和干预。青春期PCOS的患者临床表现主要为月经稀发、肥胖、痤疮等,这些属于祖国医学的肾虚痰湿症状。所以本研究实验部分制造了大鼠PCOS的模型,观察补肾涤痰汤对大鼠性激素水平、胰岛素抵抗和糖脂代谢的影响,观察大鼠造模前后卵巢组织中miRNAs的改变以及药物干预后卵巢组织中miRNAs的改变情况。临床研究部分观察补肾涤痰汤对青春期PCOS伴胰岛素抵抗患者的激素水平和糖脂代谢的影响。方法:实验研究:先饲养大鼠84只,其中正常对照组(12只)和PCOS模型组(72只)。正常对照组的大鼠给予基础饲料喂养,自由饮食饮水;模型组高脂饮食喂养后参照Poretsky造模法进行造模,第1-10天予大鼠股内侧皮下每日一次注射胰岛素,剂量由0.5iu递增至5.0iu,接下来第11-22天持续予大鼠5.0iu的胰岛素剂量,并且同时在第11-22天每日两次予大鼠人绒毛膜促性腺激素(1.5iu溶于0.2ml生理盐水)皮下注射。观察造模大鼠失去正常动情周期后,正常组选取10只,造模组选取60只造模成功的大鼠并将其分为5组:B组模型空白组,C组二甲双胍组,D组达英-35组,E组补肾涤痰汤低剂量组,F组补肾涤痰汤中剂量组,G组补肾涤痰汤高剂量组。比较处理前后大鼠的性激素水平、胰岛素抵抗、脂代谢情况。观察大鼠卵巢组织中miRNAs的差异表达,和各组miRNAs的改变情况。临床研究:将门诊90例青春期PCOS伴IR患者分别予中药、西药、中西药联合治疗三组,每组例数为30例。中药组予补肾涤痰汤口服,每日1剂,1个疗程为3个月,连续治疗2个疗程(经期停服)。西药组予二甲双胍500mg 口服,每日2次(与餐同服)。中西药联合组(同时予补肾涤痰汤及二甲双胍),按中药组和西药组服药方法,同时服用补肾涤痰汤和二甲双胍。对比三组患者治疗前后的性激素水平(T、SHBG、E2、LH、FSH、PRL)、游离睾酮指数(FAI)、胰岛素抵抗指数(IR)、体重指数(BMI)、腰臀比(WHR)、B超等指标进行检测,并进行治疗前后以及组间的差异以及三组治疗前后中医证候积分和整体疗效的评估。结果:(1)模型组大鼠失去正常的动情周期;较正常对照组大鼠卵巢体积增大,颜色苍白、包膜增厚、包膜下见较多的囊状扩张卵泡,呈多囊样改变;模型组大鼠的血清T水平明显高于正常对照组,差异有显著性(P<0.01);模型组大鼠的胰岛素抵抗指数(HOMA指数)明显高于正常对照组,差异有显著性(P<0.01)。(2)高脂饮食喂养后的大鼠体重和标准饲料喂养的正常组大鼠比较差异有显著性(*P<0.05);其他药物干预的组别和正常空白对照组大鼠体重相比较无明显差别;模型空白组的T、LH、E2浓度较正常对照组明显升高(P<0.05);中药各剂量组和达英组,T水平均低于二甲双胍组(P<0.05),说明降低T的效果,中药各剂量组和达英效果均优于二甲双胍组。模型组大鼠HOMA-IR指数显著高于正常对照组,说明造模后大鼠出现了胰岛素抵抗。HOMA-IR指数中药中低剂量组、达英组和二甲双胍组相比较,差异有明显显著性(##P<0.01),中药高剂量组和和二甲双胍组相比较,差异有显著性(#P<0.05),说明改善IR二甲双胍效果最佳,中药高剂量组次之,达英改善IR效果不显。模型空白组大鼠的TG、LDL、TC和正常对照组相比差异有明显显著性(**P<0.01)。中药各剂量组和达英组的TC数值均高于二甲双胍组,差异有明显显著性(**P<0.01),说明二甲双胍组降低TC的效果优于其他药物干预组。中药各剂量组的TG、LDL数值明显低于模型对照组,差异有明显显著性(**P<0.01),说明中药有降低TG、LDL的作用。中药各剂量组的TG数值和二甲双胍组无明显差异,说明两者效果相当。(3)造模组 miR-743b-3p、miR-743b-5p、miR-202-5p、miR-465-3p、miR-463-5p、miR-881-3p、miR-463-3p、miR-881-3p、miR-463-3p、miR-741-3p、miR-3580-5p、miR-871-5p、miR-547-3p、miR-871-3p、miR-743a-3p、miR-743a-5p、miR-465-5p、miR-471-5p、miR-878、miR-542-3p、miR-322-5p、miR-471-3p、miR-19a-3p 等下调表达,miR-369-5p、miR-10a-5p、miR-187-3p、miR-187-5p、miR-369-3p、miR-540-5p、miR-376b-3p、miR-136-5p、miR-10a-3p、miR-672-3p、miR-449a-5p、miR-449c-5p、miR-34c-5p、miR-92b-5p、miR-34b-5p、miR-34b-3p、miR-34c-3p 等表达上调。已知的MaturemiRNA在各组表达量比较:miR-135a在造模后表达明显上调,在药物干预后二甲双胍组表达下调最明显,中药组表达亦下调,达英组没有明显降调。miR-145a(miR-145a-3p、miR-145a-5p)在造模后表达上调,在药物干预后二甲双胍组和中药组表达下调。miR-146a(miR-146a-5p、miR-146a-3p)在造模后表达上调,在药物干预后达英35组表达下调,二甲双胍组和中药组表达仍有轻微上调。造模后let-7家属中let-7f-2-3p下调明显。(4)在对青春期PCOS患者的临床研究中发现,补肾涤痰汤的降T作用优于二甲双胍组(P<0.05);二甲双胍及中西药联合组改善IR的作用优于中药组(P<0.05)。补肾涤痰汤在改善中医证候和降雄激素方面优于二甲双胍(P<0.05),在降低体重指数(BMI)、腰臀比(WHR)方面三组无差异性。结论:PCOS肾虚痰湿模型大鼠失去正常的动情周期,卵巢见多囊样变,雄激素水平高并出现IR及排卵障碍。补肾涤痰汤能明显改善大鼠的性激素水平、IR和脂代谢状况,降低T水平优于达英35及二甲双胍;中药补肾涤痰汤各剂量组均可降低PCOS模型组大鼠的体重;中药各剂量组均有降低T的效果,中药各剂量组和达英降低T的效果均优于二甲双胍组;中药各剂量组和达英组降低TC的效果不如二甲双胍组;中药补肾涤痰汤可以降低TG、LDL水平;改善IR二甲双胍效果最佳,中药高剂量组次之,达英改善IR效果不显。在造模组和正常组卵巢组织中见明显的miRNAs差异表达谱,且在药物干预后在西药中药各组之间也存在差异表达,常见的miRNA如miR-135a、miR-145、miR-146a。补肾涤痰汤对多个miRNAs均有调控作用。补肾涤痰汤在改善青春期PCOS伴IR患者的中医证候和降雄激素方面优于二甲双胍,在降低体重指数(BMI)、腰臀比(WHR)方面与二甲双胍治疗效果相当;改善IR效果,补肾涤痰汤不如二甲双胍。总疗效判定中西药联合组效果更佳。
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