【摘 要】
:
H5N6亚型禽流感病毒(AIVs)不仅在全球许多国家和地区的野鸟和家禽中广泛流行和传播,而且自2014年首次感染人以来,H5N6亚型AIVs在全球共造成52人感染,26人死亡。国家禽流感参考实验室的长期研究表明,H5N6亚型AIVs对哺乳动物的致病力呈现明显的多样性,部分病毒对哺乳动物呈现高致死能力。因此,了解和深入探讨H5N6亚型AIVs引发哺乳动物致病的分子机制对于该病毒可能引起的人间流感大流
论文部分内容阅读
H5N6亚型禽流感病毒(AIVs)不仅在全球许多国家和地区的野鸟和家禽中广泛流行和传播,而且自2014年首次感染人以来,H5N6亚型AIVs在全球共造成52人感染,26人死亡。国家禽流感参考实验室的长期研究表明,H5N6亚型AIVs对哺乳动物的致病力呈现明显的多样性,部分病毒对哺乳动物呈现高致死能力。因此,了解和深入探讨H5N6亚型AIVs引发哺乳动物致病的分子机制对于该病毒可能引起的人间流感大流行的预警和防控指导具有重要的意义。本研究选取了两株遗传背景相似、但对小鼠的致病力具有显著差异的H5N6亚型AIVs——A/duck/Guangdong/S1330/2016(H5N6)(简称GD/330)和A/environment/Fujian/S1160/2016(H5N6)(简称FJ/160)作为研究对象,以开展H5N6亚型AIVs对哺乳动物致病力差异的分子机制研究。其中,GD/330在小鼠体内表现为高致病力,其MLD50为2.5 log10EID50;而FJ/160在小鼠体内表现为低致病力,其MLD50为7.4 log10EID50,具体研究内容如下:本研究利用反向遗传操作技术,以GD/330为骨架救获了一些列重组病毒和突变病毒,同时以小鼠为模型评价了这些毒株的致病力。结果表明,当引入FJ/160的HA基因节段后,GD/330-FJ/160HA的致病力较r GD/330减弱了大约1000倍,说明HA基因是减弱GD/330在小鼠体内致病力的关键基因节段。进一步的研究表明,HA基因的G225W氨基酸突变使r GD/330的致病力减弱了大约631倍,说明HA基因第225位点的氨基酸是导致两株H5N6亚型AIVs在小鼠体内致病力差异的关键氨基酸位点。体外复制动力学结果表明,GD/330-HA-G225W在A549细胞中同一时间点的复制滴度较r GD/330明显降低,说明HA基因的G225W氨基酸突变减弱了H5N6亚型AIVs在哺乳动物细胞中的复制能力。多核体的形成实验结果表明,r GD/330和r FJ/160 HA蛋白激活的p H分别为5.5和5.9,GD/330-HA-G225W HA蛋白激活的p H为5.7,说明HA基因的G225W氨基酸突变升高了H5N6亚型AIVs HA蛋白激活的p H。测定病毒的稳定性后发现,GD330-HA-G225W的稳定性与r GD/330差异显著,说明HA基因的G225W氨基酸突变降低了H5N6亚型AIVs的酸稳定性和热稳定性。HA蛋白的结构预测表明,甘氨酸是最小的氨基酸,以氢原子作为其侧链;而色氨酸是最大的氨基酸,以吲哚作为其侧链。因此,不同的空间位阻可能是导致两株H5N6亚型AIVs的HA蛋白功能不同的原因。综上所述,本研究阐明了HA基因第225位点的氨基酸是导致两株H5N6亚型AIVs在小鼠体内致病力差异的关键氨基酸位点。HA基因的G225W氨基酸突变通过升高GD/330 HA蛋白激活的p H以及降低GD/330的酸稳定性和热稳定性,从而减弱了H5N6亚型AIV在小鼠体内的致病力。本研究为H5亚型AIVs的疫苗和抗病毒药物的研发提供了参考依据。
其他文献
背景 泌乳启动延迟(DOL)是造成母乳喂养失败的一个重要原因,妊娠期增重过多、产后抑郁会增加产后DOL的发生风险,而妊娠期体力活动(PA)可以有效防止体质量增加过多,改善产后负性情绪,有益于母乳喂养,但目前妊娠期PA与DOL的关系尚不明确。目的 探讨妊娠晚期孕妇PA现状及对DOL的影响,为早期预防DOL,保障母乳喂养提供依据。方法 采取前瞻性研究设计,取2020年12月至2021年8月在中国人民解
母体微生物的垂直传递对婴儿肠道菌群的建立具有重要作用。然而,母体微生物究竟以何种途径传递给婴儿目前尚不清楚。此外,益生菌是否可以实现母婴间垂直传递也尚未得到证实。本研究以一株分离自健康妇女母乳的乳双歧杆菌Probio-M8(Bifidobacterium animalis subsp.lactis Probio-M8,简称Probio-M8)作为生物标记菌株,结合纯培养和高通量测序技术研究双歧杆菌
结构变异(Structural Variation,SV)是基因组遗传变异的重要方式之一,基因组的SV与人类疾病、动植物表型遗传机制等息息相关。高通量三代测序的纳米孔测序技术(Oxford Nanopore Technology,ONT)具有序列读长(read)长度长、无GC偏好和PCR扩增等特点,使其检测基因组的SV具有明显优势。与Pac Bio测序数据相比,ONT测序数据具有明显的自身特征,如
过去几十年间,中国的膳食模式发生了显著变化。城市运动导致了中国传统饮食的改变,增加了脂肪的摄入量,减少了中国饮食中常见的碳水化合物摄入量。2002-2011年碳水化合物供能比从61.0%下降到55.0%,脂肪供能比从28.0%增加到32.9%,而蛋白质供能比无明显变化。在经历显著的营养转型的同时,随着经济的快速增长,我国相关的疾病模式也随之改变。与营养相关的慢性非传染性疾病的流行,包括肥胖、2型糖
西北黄土高原半干旱雨养农业区水热皆不足,旱地春玉米主要以全膜双垄沟栽培为主。地膜覆盖造成的残膜污染日益受到关注,该技术在小麦和马铃薯上保墒增产显著,但在玉米上的应用效果如何,尚未开展系统研究。在西北旱作春玉米产区水热环境背景下,于2017-2019年开展了秸秆带状覆盖与两种全膜双垄沟模式的比较试验,系统测定了覆盖方式间土壤水分、土壤温度、生长指标、生态生理指标、产量结构因子和产量的差异,并分析了覆
全面推进实施制造强国战略的背景下,国家将面向智能制造的生产运营、质量管理问题均列入了管理科学部“十四五”规划和2022年管理科学部重点项目资助领域。《中国制造2025》也提出要以“质量为先”作为发展理念。并且随着现代装备日趋精密化、复杂化,在实际应用中,对于获取故障率高且不易拆解的复杂部件的健康状态尤为关键,部件故障或者退化的多重后果也可被纳入运行可靠性度量中,在进行运维决策时需要统筹考虑,以符合
庞大的人口基数和不断增加的人口,决定了高产始终是我国小麦育种的主要目标。在常规育种方法对提高小麦产量的难度逐渐增加的情况下,挖掘并利用高产基因,用新的育种手段提高小麦产量,是目前阶段的有效方法之一。TaTAP46基因是TOR信号通路中TOR调控PP2A的重要调控基因之一,也是决定产量相关性状的重要基因之一。本研究通过分析TaTAP46基因的结构、基因进化、表达部位;检测TaTAP46基因对小麦幼穗
肠道微生物是宿主与微生物在长期协同进化过程中相互选择和适应形成的。益生菌作为肠道菌群中的共生菌在人类和动物健康中发挥着非常重要的作用。近年来,益生菌应用对于改善饲料品质、提高利用效率、促进动物健康等方面的效果较好,市场接受度日益提高,已成为一个快速发展的新兴产业。农业农村部发布的《饲料添加剂品种目录》中列出微生物菌种有34种,其中乳酸菌有23种。然而面对我国畜禽养殖业规模的不断扩大、科学养殖概念的
A型流感病毒是造成上呼吸道感染的重要原因之一,可以引起严重的急性呼吸道疾病,全球每年因A型流感病毒感染导致的死亡病例数以万计,对公共卫生安全造成不可估量的损失。禽流感是由A型流感病毒引起的人畜共患传染病,可在禽类与人之间传播。目前,针对A型流感病毒的防控措施主要是疫苗和药物,但是流感病毒能够通过不断的变异进化获得抗药性,为了对抗病毒的这一特性,我们需要探索新的宿主蛋白来针对禽流感病毒。由于流感病毒
岷县黑裘皮羊是我国濒危的地方绵羊品种之一,早期以生产黑色裘皮和二毛皮而著称。岷县黑裘皮羊具有突出的黑色性状,毛、皮、眼睑、唇、口腔粘膜和舌头等皆表现黑色,特殊的表型表明其与一般绵羊品种在黑色素沉积方面的差异,而表型差异的根本原因在于基因的调控机制和遗传基础上的差异。本研究针对岷县黑裘皮羊在颜色表型方面的特点,以岷县黑裘皮羊作为试验动物群体,选取与之有显著表型差异的小尾寒羊群体作为对照组,从宏观上检