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目的:研究六味地黄丸对肾虚阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）小鼠海马神经元胰岛素信号转导通路的干预作用及机制,探讨补肾填精法对AD的部分治疗机制,为阿尔茨海默病的预防及治疗提供实验依据。材料与方法:健康雄性C57-B6小鼠分为正常对照组、AD组、肾虚AD组、六味地黄丸组(1.08g·kg-1)和吡格列酮组(20g·kg-1)。正常对照组、AD组每日皮下注射生理盐水(15ml·kg-1),肾虚AD组、六味地黄丸组和吡格列酮组每日皮下注射氢化可的松注射液(15ml·kg-1),连续注射20天。第21天除正常对照组侧脑室注射无菌生理盐水外,其余4组侧脑室注射β淀粉样蛋白(Aβ25-35),6μg/只。从造模结束后第2天起,六味地黄丸组小鼠按照1.08g·kg-1给予灌胃,吡格列酮组小鼠按照20g·kg-1给予灌胃（按照人与小鼠体表面积比换算等效剂量）,而正常对照组、AD组和肾虚AD组则给予等体积生理盐水灌胃,每日灌胃1次,连续给药4周。采用Morris水迷宫实验观察各组小鼠行为学变化;酶联免疫吸附实验（ELISA）检测各组小鼠脑脊液中胰岛素（Insulin,INS）水平;透射电镜观察海马神经元形态变化;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测胰岛素受体β（Insulin receptor beta,IR-β）、磷酸化胰岛素受体底物1（Phosphorylated insulin receptor substrate1,p-IRS-1）、磷酸化磷脂酰肌醇-3-激酶（Phosphorylated phosphatidylinositol-3-kinase,p-PI3K）、磷酸化蛋白激酶B（Phosphorylation protein kinase B,p-AKT）蛋白表达、糖原合成酶激酶3β（Glycogen synthase kinase3β,GSK3β）蛋白表达。结果:1.水迷宫实验结果显示,与正常对照组相比,AD组与肾虚AD组逃避潜伏期延长（P＜0.01）,穿越目标象限时间和有效区停留时间减少（P＜0.01）;与肾虚AD组相比,六味地黄丸组和吡格列酮组逃避潜伏期缩短（P＜0.01）,穿越目标象限时间和有效区停留时间增加（P＜0.01）。2.透射电镜观察结果显示,与正常对照组相比,AD组与肾虚AD组小鼠海马神经元细胞核明显皱缩且染色体边集严重,线粒体肿胀;与肾虚AD组相比,六味地黄丸组和吡格列酮组小鼠海马神经元结构、形态明显改善,染色体边集及线粒体肿胀减轻。3.免疫荧光结果显示,与正常对照组相比,AD组和肾虚AD组细胞外Aβ的沉积显著增加（P＜0.01）;与AD组相比,肾虚AD组Aβ的沉积显著增加（P＜0.01）;与肾虚AD组相比,六味地黄丸组和吡格列酮组细胞内的Aβ沉积显著减少（P＜0.01）。与六味地黄丸组相比,吡格列酮组细胞内的Aβ沉积显著减少（P＜0.01）。4.ELISA结果显示,与正常对照组相比,AD组与肾虚AD组小鼠脑脊液中胰岛素水平显著降低（P＜0.01）;肾虚AD组数值略低与AD组,但并无统计学差异;与肾虚AD组相比,六味地黄丸组和吡格列酮组小鼠脑脊液中胰岛素水平显著增多（P＜0.01,P＜0.05）。六味地黄丸组与吡格列酮组相比,小鼠脑脊液胰岛素含量无统计学差异。5.Western Blot结果显示,与正常对照组相比,AD组与肾虚AD组小鼠海马IR-β、p-IRS-1、p-PI3K、p-AKT蛋白表达显著下降（P＜0.01）,GSK-3β蛋白表达显著上升（P＜0.01）;与AD组相比,肾虚AD组海马p-IRS-1、p-PI3K、p-AKT表达显著减少（P＜0.01,P＜0.05）,GSK-3β蛋白表达显著上升（P＜0.05）;与肾虚AD组相比,六味地黄丸组和吡格列酮组小鼠海马IR-β、p-IRS-1、p-PI3K、p-AKT蛋白表达显著上升（P＜0.01）,GSK-3β蛋白表达显著下降（P＜0.01）。六味地黄丸组相比于吡格列酮组上述指标表达情况无统计学差异。结论:补肾填精法能提高肾虚AD小鼠的认知能力,保护海马神经元细胞,提高脑脊液胰岛素水平,改善胰岛素信号转导通路,对肾虚阿尔茨海默病有一定治疗作用。