高纯度香菇多糖的分离提取及其分级研究

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香菇子实体营养丰富,不仅是人们理想的美味佳肴,而且具有良好的保健功能。其中的香菇多糖,是食品、医疗、保健等行业进行产品开发的重要资源。本研究的主要内容和结果如下:1.建立了测定香菇多糖与果胶混合物中香菇多糖含量的方法。果胶是一种可溶于水的多糖,香菇多糖的提取液中通常都含有果胶杂质。本研究建立了同时测定样品溶液中葡萄糖及葡萄糖醛酸含量的方法,该方法能够消除在测定葡萄糖醛酸过程中葡萄糖产生的干扰。通过建立的模型验证了葡萄糖和葡萄糖醛酸具有良好的加和性,证明了该方法准确可靠。2.研究了微波法和传统热水法从香菇中提取香菇多糖的工艺。对于传统热水法,通过研究不同料液比、加热温度和加热时间,最终确定了最佳料液比为1∶20,加热温度为90℃,加热时间为3小时,多糖提取率为9.97%。对于微波法,通过研究不同料液比、微波功率、加热温度和辐射时间,最终确定了最佳料液比为1∶30,微波功率为800W,加热温度为80℃,辐射时间为15min,多糖提取率为11.78%.通过对比两种优化方法,结果发现微波法具有提取率更高,能耗低,省时等优点。3.研究了香菇多糖分离纯化的方法。第一步分离纯化:通过用Sevage法和Sevage-酶法对香菇多糖粗品纯化进行研究,结果发现Sevage-酶法具有更高的脱蛋白质效果,其一次脱蛋白质率为92.9%,多糖中蛋白质的百分含量为19.8%,多糖损失仍然很高。为此,开发了使用CaCl2、草酸铵等试剂,经过螯合、絮凝沉淀过程的CAS方法,其一次脱蛋白质率为96.5%,多糖中蛋白质百分含量为1.22%。第二步分离纯化:对第一步分离纯化产物经过酶分解、透析和活性炭吸附过程处理,并经紫外、红外光谱扫描,分析该产物为一种不含有蛋白质、核酸、果胶等杂质的具有β-D-吡喃葡聚糖结构的香菇多糖。处理过程中,所加CaCl2质量分数为22.2%,草酸铵质量分数为1.6%,酶解条件为10%胰蛋白酶,pH7.9,温度37℃,酶解时间为5小时,透析时间为4小时,活性炭质量为样品的6%,香菇多糖回收率为5.04%。4.对香菇多糖分级进行了初步研究。以丙酮做为介质,采用有机溶剂分级沉淀法对香菇多糖进行了分级实验,在丙酮浓度为30%和50%时,得到两组不同分子量的香菇多糖。并用粘度法测定了各组分的粘均分子量,分别为[MV]组分Ⅰ=4.25×105,[MV]组分Ⅱ=0.88×105
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