纳米级硅酸盐微粒吸附饲料铅的研究

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本课题构建的纳米硅酸盐微粒(PBNK)在体外对铅具有选择性吸附作用,应用Caco-2细胞模型模拟动物消化道,探讨了在不同的暴露条件下,PBNK的安全性、铅对肠上皮细胞的毒性及PBNK吸附细胞培养体系中铅毒的效果。并以“杜长大”三元杂交猪为试验动物,研究了PBNK在胃肠道对日粮铅的吸附作用,从生长性能、养分表观消化率、组织中铅残留、肉质等方面探讨了PBNK对铅所致不良影响的缓解作用。主要结果如下:体外PBNK对Pb2+、Cu2+、Zn2+、Cd2+、Fe2+离子的选择性吸附试验结果表明:吸附平衡后PBNK对各种离子的吸附有较强的选择性,尤其对pb2+有较强的亲和力,而对Cu2+、Zn2+、Fe2+和Cd2+亲和力较弱或几乎没有吸附。体外细胞培养结果表明:不同浓度的PBNK在不同作用时间对细胞LDH活性和细胞活力均无显著性影响(p>0.05)。而铅浓度达到40、80mg/L时,细胞LDH活性显著升高(p<0.05),并显著降低了Caco-2细胞的增殖率(p<0.05),明显改变了细胞的形态。且作用时间越长,铅对细胞增殖率的抑制作用越大,呈明显的时效关系。当在含40mg/L铅的细胞培养液中同时添加0.5%PBNK时,Caco-2细胞的活力保持正常。动物饲养试验表明:与对照组相比,添加10.0mg/kg铅即Pb组猪的日增重和日采食量分别降低了16.13%(p<0.05)和6.85%(p<0.05),料重比增加了10.91%(p<0.05);Pb+PBNK组的同增重和日采食量分别比Pb组提高了16.44%(p<0.05)和5.61%(p<0.05),料重比降低了9.04%(p<0.05),与对照组无显著差异(p>0.05)。同时结果还表明在常规饲料(低铅含量)中添加PBNK有改善猪同增重、日采食量及料重比的趋势,但差异不明显(p>0.05)。组织器官铅残留测定结果表明:对照组猪肌肉、肝脏和肾脏中铅的含量分别是0.45、1.44、1.79μg/g,分别是欧盟残留限量标准的4.5、2.88、3.79倍,在基础日粮中添加PBNK后,猪肌肉、肝脏和。肾脏中铅的含量分别降低为欧盟残留限量标准的90%、74%、96%;加铅组猪肌肉、肝脏和肾脏中铅的含量分别是欧盟残留限量标准的13.4、9.18、10.44倍;添加PBNK后上述含量分别降低为欧盟残留限量标准的3.0、1.98、2.18倍。此外,与对照组比较,单独添加PBNK组猪的肌肉、心脏、脾脏、胰脏、肺、脑、骨骼和毛发中铅的含量均分别显著减少了80%(p<0.01)、32.50%(p<0.05)、49.12%(P<0.05)、45.90%(P<0.05)、59.09%(p<0.05)、38.89%(p<0.05)、70.0%(p<0.01)、60.0%(p<0.01);而添加10mg/kg铅+0.5%PBNK组猪的肌肉、心脏、脾脏、胰脏、肺、脑、骨骼和毛发中铅的残留量比单独添加10mg/kg铅组分别下降了78.72%(p<0.01)68.47%(p<0.01)、74.69%(p<0.01)、73.96%(p<0.01)、84.14%(p<0.01)、62.07%(p<0.01)、78.90%(P<0.01)、55.88%(p<0.01)。粪、尿铅含量分析可见:与对照组相比,单独添加PBNK组猪粪中铅的含量显著增加了51.0%(p<0.05),尿中铅的含量显著降低了81.9%(p<0.01);而添加10mg/kg铅+0.5%PBNK组猪粪中铅的含量比单独添加10mg/kg铅组提高了67.65%(p<0.05),尿中铅的含量明显减少了86.76%(p<0.01)。养分表观消化率结果显示:添加10.0mg/kg铅组粗蛋白、钙和磷的表观消化率均显著低于对照组(p<0.05);高铅污染日粮添加0.5%PBNK后粗蛋白、钙和磷的表观消化率比Pb组分别提高了7.03%(p<0.05)、10.55%(p<0.05)和11.12%(p<0.05)。组织铁、铜、锌、钙测定结果可见:与对照组相比,添加10mg/kg铅组猪肝脏、肾脏、脾脏和骨骼中的铁、铜、锌、钙含量显著降低(p<0.05);相对于10mg/kg铅组,添加10mg/kg铅+0.5%PBNK组猪各组织中的铁、铜、锌、钙含量又显著提高(p<0.05);对照组、PBNK组和Pb+PBNK组间差异不显著(p>0.05)。血清相关代谢指标分析显示:与对照组相比,添加10.0mg/kgPb组的GOT和GPT含量分别升高了16.97%(p<0.05)和17.55%(p<0.05),添加了PBNK后,Pb+PBNK组GOT和GPT含量又明显降低至对照组水平;单独添加PBNK组猪血清中钙、磷含量和碱性磷酸酶活力比对照组分别上升了15.60%(p<0.05)、10.98%%(p<0.05)、11.36%(p<0.05);与单独加铅组相比,添加10mg/kg铅+0.5%PBNK组猪血清中钙、磷含量和碱性磷酸酶活力分别显著上升了32.96%(p<0.05)、19.87%%(p<0.05)、24.85%(p<0.05)。背最长肌肉色和肌红蛋白的测定显示:Pb组的肉色和肌红蛋白含量分别比对照组降低了35.87%(p<0.05)和31.13%(p<0.05);而添加硅酸盐纳米添加剂后,Pb+PBNK组猪的肉色大大得到改善,比未添加Pb组分别提高44.01%(p<0.05)、49.04%(p<0.05);PBNK组与对照组相比肉色亦有所改善,但两者差异不显著(p>0.05)。抗氧化能力研究表明:与对照组相比,加PBNK组猪血清、肝脏中MDA含量显著降低(p<0.05),CAT、SOD、GSH-Px活力均显著提高(p<0.05);与10mg/kg铅组比较,添加10mg/kg铅+0.5%PBNK组猪血清和肝脏中MDA含量明显下降(p<0.05),CAT、SOD、GSH-Px活力明显上升(p<0.05)。这些结果提示:应用纳米技术构建的纳米硅酸盐微粒(PBNK)对重金属铅具有高效选择性吸附能力,对其他必需矿物元素亲合力较弱,且自身不具有细胞毒性,对肠上皮细胞安全无毒副作用;PBNK能够有效吸附食糜中的铅,阻止其通过吸收途径进入动物体内,使之随粪便排出体外,从而显著改善猪的生长性能,降低了铅在肌肉、肝、肾等组织器官中的残留,减轻铅污染日粮对动物养分利用、肉质、造血功能、抗氧化能力等的不良影响,保障了动物健康和动物产品安全。本研究为解决动物产品铅残留提供了切实可行的途径。
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