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肝纤维化是由各种致病因子所致的细胞外基质（Extra cellular matrix,ECM）过度沉淀的病理过程,阻止或减缓肝纤维化的发生与发展是预防肝硬化的关键。目前临床主要采糖皮质激素类、黄酮类等化学药物进行肝纤维化治疗,这种治疗方式虽然疗效确切,但存在副作用大和易耐药等问题,因此,现阶段迫切需要寻找一种作用温和、毒副作用小和耐药性低的新型抗纤维化疗法。Omega-3多不饱和脂肪酸（Omega-3 polyunsaturated fatty acid,ω-3 PUFAs）源于植物和深海鱼类,主要由α-亚麻酸（α-linolenic acid,ALA）、二十碳五烯酸（Eicosapentaenoic acid,EPA）和二十二碳六烯酸（Docosahexaenoic acid,DHA）组成,是一种安全可靠和无耐药性的生物活性化合物。既往研究已证实ω-3 PUFAs对机体炎症具有显著的调控作用,近年来已成为许多慢性疾病饮食干预和治疗的研究热点。哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（Mammalian target of rapamycin,mTOR）信号通路作为细胞生长中心协调器,对肝星状细胞（Hepatic stellate cells,HSCs）的活化增殖和胶原纤维的表达具有调控作用,是肝纤维化发生发展密切相关的信号通路之一。目前,ω-3 PUFAs饮食干预对肝纤维化的防治作用及其对mTOR信号通路的影响尚不清楚,因此有待做进一步探讨。综上所述,本课题的研究意义在于探讨ω-3 PUFAs饮食干预对肝纤维化的防治作用及其对mTOR信号通路的影响,为潜在的新型抗纤维化疗法提供实验和机制基础。目的:探讨ω-3 PUFAs饮食干预对肝纤维化的防治作用及其对mTOR信号通路的影响,为其潜在的分子机制提供理论依据。方法:将20只雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、4周模型组、8周模型组和治疗组,其中4周模型组的设立是为了确定ω-3 PUFAs饮食干预开始时的肝纤维化程度。模型组和治疗组小鼠均以5 ml·kg-1每周2次的剂量腹腔注射20%CCl4玉米油溶液,对照组小鼠注射相同剂量的玉米油,除4周模型组外,其余3组持续注射8周。此外,治疗组小鼠从造模的第4周起每日1次进行4 g·kg-1 EPA/DHA的灌胃,对照组和8周模型组灌食相同剂量的生理盐水。（1）通过记录分析造模期间小鼠体重变化以及造模结束后小鼠毛色、肝脏大体形态和肝重体重比来初步鉴定肝纤维化模型是否建立成功,随后采用马松三色染色从肝脏组织形态学层面做进一步鉴定;（2）采用HE染色检测各组小鼠肝组织的病理学变化;（3）采用免疫组化（Immunohistonchemistry,IHC）方法检测各组小鼠肝组织中抗凋亡蛋白B淋巴细胞瘤因子-2（B-cell lymphoma-2,Bcl-2）、B淋巴细胞瘤因子-2-x L（B-cell lymphoma-2-x L,Bcl-x L）及细胞增殖蛋白增殖细胞核抗原（Proliferating Cell Nuclear Antigen,PCNA）的表达水平;（4）采用IHC和蛋白质免疫印迹（Westerin blot,WB）方法检测各组小鼠肝组织中肝星状细胞（Hepatic stellate cells,HSCs）活化标志蛋白α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）的表达水平;（5）采用天狼星红染色和WB方法检测各组小鼠肝组织中胶原纤维含量及促纤维化蛋白Collagen1A1和Fibronectin表达水平;（6）采用WB方法检测各组小鼠肝组织中mTOR通路相关蛋白mTOR和S6核糖体蛋白（S6 Ribosomal Protein,S6）的总蛋白表达水平及其磷酸化水平。结果:（1）与对照组相比,4周模型组小鼠的毛色体重、肝脏大体形态、肝重体重比及马松三色染色均显示其肝纤维化已经形成,表明在造模4周后,肝纤维化模型已成功建立;（2）相比于8周模型组,治疗组小鼠的肝组织结构损伤改善明显,肝细胞坏死数量和炎症细胞数量显著减少,表明ω-3 PUFAs饮食干预显著改善纤维化肝组织损伤;（3）与8周模型组相比,治疗组Bcl-2、Bcl-x L和PCNA蛋白表达显著升高。表明ω-3 PUFAs饮食干预有效抑制肝细胞的凋亡并促进肝细胞的增殖;（4）与8周模型组相比,治疗组α-SMA蛋白表达明显下调,表明ω-3 PUFAs饮食干预显著抑制HSCs的活化;（5）与8周模型组相比,治疗组小鼠胶原纤维含量及促纤维化蛋白Collagen1A1和Fibronectin表达显著降低,表明ω-3 PUFAs饮食干预具有明显的抗纤维化作用;（6）与8周模型组相比,治疗组mTOR和S6的磷酸化水平显著下降,表明ω-3 PUFAs饮食干预对mTOR通路有抑制作用,mTOR信号通路是介导其作用的信号通路之一。结论:ω-3 PUFAs饮食干预对肝纤维化具有防治作用,mTOR信号通路是其潜在的分子机制之一。