施万细胞和L-NNA对脊髓损伤后背核和红核神经元存活及其轴突再生的影响

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该实验的目的是探讨施万细胞(Schawnn cells,SCs)和N-硝基左旋精氨酸(N-nitro-L-arginine,L-NNA,NOS抑制剂)联合应用能否促进大鼠脊髓半横断受损伤神经元存活及其轴突再生.该实验分为两部分:1.施万细胞和L-NNA对大鼠脊髓半横断后的背核神经元存活及其轴突再生的影响;2.施万细胞和L-NNA对大鼠脊髓半横断后的红核神经元存活的影响.取新生大鼠坐骨神经和臂丛神经,用酶消化法获取SCs,经培养、纯化后用核荧光Hoechst33342标记,制备为3.0×10<7>/ml的细胞悬液备用.取成年SD雌鼠行T11脊髓半横断并分为4组:对照组(术后每日注射生理盐水)、SCs组(移植SCs,术后每日注射生理盐水)、L-NNA组(术后每日注射L-NNA)、联合组(移植SCs,术后每日注射L-NNA).术后26天各组于T9脊髓行荧光金(FG)逆行标记,4天后灌注固定.取材切片后观察核荧光标记SCs的情况;L1脊髓背核和脑干红核神经元被FG逆行标记情况.分别用NADPH-d组织化学染色和NOS-1免疫组织化学染色观察LI脊髓背核和脑干红核的神经元NOS表达情况.中性红染色计数L1脊髓背核存活神经元数量、背核面积和神经元胞体面积变化以及脑干红核神经元密度和红核体积的变化.综上所述:1.SCs和L-NNA都能促进脊髓半横断背核受损伤神经元的存活;两者联合应用能更好地促进受损伤背核神经元存活及其轴突再生.2.SCs能促进受损伤红核神经元存活和阻止其轴突溃变.NO/NOS也许不参与红核神经元的损伤和修复,因而L-NNA对受损伤红核神经元的存活没有影响,这与脊髓背核神经元存活和轴突再生的机制有所不同.
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