高压氧对成年大鼠MCAO术后行为学及NSCs增殖与分化的影响

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目的:探讨不同疗程高压氧(hyperbaricoxygen,HBO)对成年大鼠大脑中动脉阻塞(middlecerebralarteryocclusion,MCAO)后行为学及其对患侧海马组织中神经干细胞(neuralstemcells,NSCs)增殖和分化的影响,为HBO治疗缺血性中风患者提供理论依据。方法:1.动物分组与处理:健康雄性清洁级SpragueDawley大鼠(华中科技大学同济医学院动物房提供)72只,体重250±20g,随机分为4组:1,高压空气(hyperbaricair,HBA)组;2,常压氧(normobaricoxygen,NBO)组;3,HBO组;4,空白对照(control,CON)组。各组根据治疗时间分为4个亚组,即2d、3d、7d、14d组。采用线栓法制作MCAO模型,除CON组其余3组均于阻塞血管后2小时开始相应治疗,治疗后常规护理,每天记录生命体征及体重变化。2.行为学评分:大鼠手术清醒后行相关治疗前进行一次行为学评分,治疗疗程结束后再次进行行为学评分后即刻处死并留取患侧海马标本。CON组不做任何治疗,与其余各组同一时间进行行为学评分并留取海马标本,计算前后两次行为学评分差值作为比较对象。3.western-blot:检测各组患侧海马组织中Nestin,MAP-2,GFAP蛋白的表达量。结果:一、体重变化及行为学测试1.各组手术后平均体重均下降,HBO治疗的大鼠体重恢复较快,HBO组大鼠治疗7d后体重均高于其他组,14d治疗结束后超过其手术前自身体重,其余各组体重增长缓慢,均未达到手术前水平。2.HBO组行为学评分前后差值在7d,14d组较其他组高,但差异无统计学意义(P﹥0.05)。二、分子学变化1.Western-blot结果显示给予3种治疗后各组大鼠患侧海马nestin蛋白均较CON组升高,治疗后7d,14dHBO组nestin值较其他组升高,第14d升高明显,差异有统计学意义(p<0.05);2.MAP-2检测数值显示治疗后7d,14dHBO组均较其他组高,第7d组HBO较其他组差异有显著意义(p<0.05);3.GFAP在各组均有升高但趋势不明显,HBA组含量最高但差异无统计学意义(P﹥0.05);结论:HBO能促进MCAO术后大鼠一般情况的恢复。HBO能够持续性增加大鼠MCAO术后患侧海马NSCs的增殖,并促进其向神经元分化,同时不增加胶质细胞增生,这可能是HBO改善认知的分子机制之一。
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